东亚钳蝎钙通道样毒素的重组表达及活性研究

发布时间：2017-10-24 17:09

  本文关键词：东亚钳蝎钙通道样毒素的重组表达及活性研究

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【摘要】：目的:原核表达东亚钳蝎钙通道样毒素,分离纯化并初步探讨其生物学活性。方法:将东亚钳蝎钙通道样毒素Bm Ca基因重组到PET-GST表达载体中,转化入大肠杆菌BL21并IPTG诱导表达,Ni-Super Chelating Resin柱亲和层析纯化融合蛋白,尿素梯度透析法复性融合蛋白,采用激光共聚焦显微镜观察其对大鼠骨骼肌细胞内钙浓度的影响。结果:成功构建PET-GST-Bm Ca原核表达质粒,诱导后表达分子量约为33 k D的融合蛋白,经亲和层析得较高纯度的融合蛋白,复性后激光共聚焦扫描显微镜检测显示表明重组蛋白能可逆性的升高骨骼肌细胞内[Ca2+]i。结论:成功构建PET-GST-Bm Ca重组质粒,获得Bm Ca基因工程菌株,并表达纯化得到可作用于钙通道的重组蝎毒素蛋白。
【作者单位】： 广州医科大学药学院蛇毒研究所;
【关键词】： 东亚钳蝎 钙通道毒素 重组表达 细胞内钙离子
【基金】：广东省医学科研基金(编号:A20009247) 广州市属高校科研计划项目(编号:2012C205) 广州医科大学科研项目(编号:20062R012)
【分类号】：R384.9
【正文快照】： 蝎是地球上最古老的物种之一,为了生存,蝎在体内逐渐进化产生多种毒素多肽作为捕食和防御的武器。蝎毒素对多种离子通道具有特异性和高度选择性,因此成为探讨各类相关靶离子通道的特性及其调控细胞活动分子机制的有效探针[1-2]。但由于蝎毒成分复杂,蝎毒素多肽含量少,分离纯化

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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【共引文献】

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4 陈光;吴铭;王刚;孙e，

本文编号：1089703