水通道蛋白4重组质粒的构建及其在体外对低糖反应的观察

发布时间：2017-10-25 01:26

  本文关键词：水通道蛋白4重组质粒的构建及其在体外对低糖反应的观察

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【摘要】：目的:构建大鼠水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)重组质粒,检测融合蛋白在CTX-TNA2星形胶质细胞上的表达,同时观察低浓度葡萄糖条件下AQP4对细胞的影响。方法:通过RT-PCR方法从大鼠脑部获取AQP4基因,插入p EGFP-C2质粒中得到p EGFP-C2-AQP4-M23重组质粒,同时转染CTX-TNA2细胞后用不同浓度葡萄糖处理,通过激光共聚焦显微镜检测AQP4在细胞中的表达及低糖条件下对细胞的影响。结果:PCR和酶切鉴定结果显示插入的AQP4基因大小正确,测序结果证实成功构建了p EGFP-C2-AQP4-M23重组质粒;在激光共聚焦显微镜下观察到AQP4主要位于CTX-TNA2细胞膜上;低糖时转染AQP4的星形胶质细胞平均表面积明显高于对照组。结论:本研究成功构建了AQP4重组质粒并在CTX-TNA2细胞上成功表达,同时证实低糖时AQP4参与了星形胶质细胞水肿的形成。
【作者单位】： 上海交通大学附属第六人民医院;
【关键词】： 水通道蛋白质 绿色荧光蛋白质类 转染 细胞水肿
【基金】：国家自然科学基金资助项目(编号:31271125)
【分类号】：R3411
【正文快照】： 水通道蛋白(aquaporin,AQP)是一类具有高度水通透性的膜通道蛋白,脑组织中主要存在着两种水通道蛋白:AQP1和AQP4,其中AQP4的含量最为丰富,主要位于大脑星形胶质细胞膜上。脑创伤、代谢紊乱等过程中常继发脑水肿,研究[1]发现AQP4与脑水肿的发生密切相关。低血糖是严重临床相关

【参考文献】

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【共引文献】

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【相似文献】

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本文编号：1091446