不同佐剂对重组MUC1-MBP融合蛋白诱导的免疫活性的影响

发布时间：2017-10-28 00:15

  本文关键词：不同佐剂对重组MUC1-MBP融合蛋白诱导的免疫活性的影响

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【摘要】：MUC1粘蛋白是肿瘤相关抗原，由于正常组织和肿瘤组织表达的差异使其成为抗肿瘤治疗的理想靶点。近年本研究组研究发现大肠杆菌麦芽糖结合蛋白（maltose binding protein, MBP）能够提高融合蛋白的免疫原性，诱导机体产生细胞免疫应答。本课题组将人MUC1基因插入MBP基因下游，成功制备出重组MUC1-MBP融合蛋白，用于抗肿瘤疫苗的开发，并取得一定疗效。但由于MUC1-MBP融合蛋白单独免疫，产生的免疫应答并不强烈，因此我们需要寻找合适佐剂与之配伍，以便诱导出安全、持久、有效的免疫应答，尤其是有利于抗肿瘤作用的Th1型免疫应答。 本研究通过诱导表达、超声破碎、柱层析等方法制备出纯度较高的MUC1-MBP融合蛋白，分别与卡介苗（BCG）、卡介苗多糖核酸（BCG-PSN）、胸腺肽（Tα1）等联合免疫小鼠，观察免疫活性变化。结果发现，，只有BCG与MUC1-MBP融合蛋白联合后，脾指数、MUC1特异性淋巴细胞增殖指数、IFN-γ水平、IgG2a/IgG1等指标均明显升高，说明显著诱导产生Th1型应答。而其他配伍药物均不能明显诱导Th1型应答。本研究进一步优化BCG的免疫剂量和免疫次数，结果发现，MUC1-MBP融合蛋白配伍BCG50mg/kg·次，免疫2次所产生的血清IgG2a/IgG1值最高，Th1免疫应答倾向最明显。从小鼠体重变化来看，免疫BCG剂量过大时副作用增加。提示适量的BCG配伍MUC1-MBP融合蛋白疫苗免疫才能够诱导出最强烈的Th1型免疫应答。 本研究初步筛选MUC1-MBP融合蛋白的配伍佐剂，并建立最佳免疫方案，为MUC1-MBP融合蛋白抗肿瘤疫苗的进一步研究奠定基础。
【关键词】：重组MUC1-MBP融合蛋白 佐剂 免疫活性 Th1/Th2 肿瘤疫苗
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R392
【目录】：

• 提要4-5
• 中文摘要5-8
• Abstract8-15
• 第1章 文献综述15-25
• 1.1 MUC1 的生物学特性16-17
• 1.2 MUC1 与肿瘤17-18
• 1.3 以 MUC1 为靶点的免疫治疗的研究进展18-22
• 1.4 肿瘤疫苗佐剂的研究进展22-23
• 1.5 MBP 免疫功能的研究进展23
• 1.6 研究内容23-25
• 第2章 MUC1-MBP 融合蛋白和 MUC1 多肽的制备及鉴定25-33
• 2.1 实验材料25-26
• 2.2 实验方法26-30
• 2.3 实验结果30-33
• 第3章 不同佐剂对 MUC1-MBP 融合蛋白诱导的免疫活性的影响33-44
• 3.1 实验材料33-34
• 3.2 实验方法34-38
• 3.3 实验结果38-44
• 第4章 MUC1-MBP 融合蛋白与BCG 联合免疫方案的优化44-49
• 4.1 实验材料44-45
• 4.2 实验方法45-46
• 4.3 实验结果46-49
• 第5章 讨论49-54
• 5.1 MUC1-MBP 融合蛋白配伍佐剂的选择49-50
• 5.2 不同佐剂联合 MUC1-MBP 融合蛋白对免疫活性的影响50-52
• 5.3 MUC1-MBP 融合蛋白疫苗与 BCG 联合免疫方案的优化52-54
• 结论54-55
• 参考文献55-65
• 攻读硕士学位期间取得的科研成果65-66
• 致谢66

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 刘扬东;胸腺素α_1在肿瘤治疗中的应用进展[J];中国肿瘤生物治疗杂志;2001年02期

2 赵小霞;马吉春;方芳;周静;宋献美;柳忠辉;台桂香;;大肠杆菌麦芽糖结合蛋白(MBP)诱导小鼠Th1细胞的活化作用[J];中国免疫学杂志;2009年06期

本文编号：1105817