大鼠脑皮质星形胶质细胞的体外优化培养及鉴定

发布时间：2017-11-01 21:01

  本文关键词：大鼠脑皮质星形胶质细胞的体外优化培养及鉴定

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【摘要】：目的旨在获得高纯度的星形胶质细胞,并对不同培养时期的细胞进行鉴定,为进一步研究奠定基础。方法常规分离新生SD大鼠大脑皮质并制备单细胞悬液,采用差速黏附加摇床震荡法对所获得的细胞进行纯化。倒置相差显微镜及HE染色观察细胞形态,GFAP免疫荧光对获得细胞进行鉴定。结果原代培养的皮质细胞从3d开始迅速增殖,9~12d即可铺满瓶底,此时细胞呈明显的分层生长,星形胶质细胞位于底层,形态多样,阳性率为(67.2±7.1)%;经过1次传代后,GFAP阳性率有所提升(84.0±6.0)%,但不能完全去除小胶质细胞及少突胶质细胞,细胞仍呈分层生长;至第3次传代后,获得大量几乎为单一种类的星形胶质细胞,其胞体较大、突起较短粗,一般2~3个,胞核圆形或椭圆形,常偏于一侧,GFAP染色呈强阳性,阳性率可达(97.6±2.4)%。结论通过差速黏附与摇床震荡相结合的方法,获得了高纯度且生长状态良好的星形胶质细胞。
【作者单位】： 西安交通大学医学部人体解剖与组织胚胎学系;西安交通大学医学部神经生物学研究所;
【关键词】： 星形胶质细胞 大脑皮质 细胞培养 大鼠
【基金】：陕西省自然科学基金资助项目(No.2012JQ4011,2014JM4096) 中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(No.xjj2012011)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 星形胶质细胞是神经组织内数量最多、分布最广的胶质细胞,在神经系统发育、突触传递、神经系统内环境的稳定等多种正常生理活动以及神经系统疾病的病理机制中都起着十分重要的作用[1]。目前,用于实验研究的星形胶质细胞在很大程度上来源于啮齿类动物脑组织的原代培养,其中最常

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