表达HBsAg基因的重组质粒与重组腺病毒的免疫学初步研究

发布时间：2017-11-06 05:34

  本文关键词：表达HBsAg基因的重组质粒与重组腺病毒的免疫学初步研究

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【摘要】：乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus, HBV)是病毒性肝炎的主要病原体之一,在我国广泛流行,可引起急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、肝细胞性肝癌等。现阶段的药物也只能通过减缓肝硬化进程、降低肝癌发生率来延长患者寿命,无法彻底治愈,严重危害着公众健康。因此,亟待发展一种能够彻底治愈HBV感染的方法,而治疗性疫苗是目前最具发展潜力的治疗手段之一。本研究选取重组质粒pVR-S与重组腺病毒rAdV-S进行免疫学初步研究,两者均表达我国人群中广泛分布的adr型乙肝病毒的S基因。首先,采用电击注射与肌肉注射两种方法给Balb/c小鼠免疫重组质粒pVR-S, ELISA检测HBsAb抗体水平,评价注射方法对免疫效果的影响；其次,分别间隔4周和3周免疫重组质粒pVR-S,根据体液免疫效果了解适宜的免疫间隔；再次,分别以重组质粒pVR-S单独免疫或者以重组腺病毒rAdV-S单独免疫,分析比较两者诱导的免疫效果：最后,联合免疫重组质粒pVR-S与重组腺病毒rAdV-S,采用ELISA和ELISpot分别检测体液免疫水平和细胞免疫水平,比较联合免疫与单独免疫对小鼠免疫应答的不同影响。实验结果发现,对重组质粒pVR-S而言,电击注射能够诱导较高强度的体液免疫应答,而单纯的肌肉注射诱导的体液免疫水平较低,且间隔4周免疫重组质粒pVR-S相对于间隔3周不仅能更快提升HBsAb抗体水平,还能减少所需的免疫次数。pVR-S引起体液免疫应答的速度较慢,至少在初次免疫后的第6周才会出现应答,而rAdV-S能够在短期内迅速诱导体液免疫应答,在初次免疫后第2周即可产生HBsAb抗体,最终单独免疫重组腺病毒rAdV-S诱导的体液免疫应答和细胞免疫应答水平也始终高于单独免疫重组质粒pVR-S。联合免疫pVR-S和rAdV-S能够比单独免疫pVR-S组产生更强的体液和细胞免疫效果,另外,仅免疫一次rAdV-S时,联合免疫组诱导的体液免疫和细胞免疫应答比单独免疫rAdV-S组强；而免疫两次rAdV-S时,联合免疫组诱导的细胞免疫应答也比单独免疫rAdV-S组强。综上,间隔4周电击注射重组质粒pVR-S能更好地诱导体液免疫应答。无论是体液免疫还是细胞免疫,重组腺病毒rAdV-S都能诱导产生比重组质粒pVR-S更好的免疫效果。更重要的是,联合免疫pVR-S与rAdV-S能够诱导比单独免疫组强度更高的细胞免疫应答,有助于提升机体的抗病毒能力。
【学位授予单位】：中国疾病预防控制中心
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R373.21

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