TAT-Ag85B蛋白疫苗的制备和抗结核分枝杆菌效果评价

发布时间：2017-11-10 04:18

  本文关键词：TAT-Ag85B蛋白疫苗的制备和抗结核分枝杆菌效果评价

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【摘要】：目的探讨利用HIV反向转导结构域(TAT-PTD)系统表达的转导性Ag85B蛋白疫苗的抗结核分枝杆菌效应。方法构建p ET28a-Ag85B、p ET28a-TAT-Ag85B质粒,原核表达纯化和鉴定后获得Ag85B、TAT-Ag85B蛋白;将BALB/c小鼠随机分为3组:Ag85B组,TAT-Ag85B组,PBS组。重组蛋白经皮下免疫小鼠3次,末次免疫后1周处死部分小鼠,ELISA检测小鼠血清中Ag85B抗体滴度,以及脾细胞分泌的γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)的水平;用流式细胞术检测巨噬细胞经Ag85B、TAT-Ag85B蛋白刺激后表面分子CD80、CD86变化情况;剩余小鼠经尾静脉感染H37Rv结核分枝杆菌,感染后第1、2、4、8周动态监测小鼠肺和脾内结核分枝杆菌载量,并在感染后8周取肺脏进行HE染色,观察肺组织病变情况。结果成功获得Ag85B、TAT-Ag85B蛋白;与Ag85B相比,TAT-Ag85B诱导小鼠表达高水平的Ig G和IFN-γ、IL-2,感染小鼠的脾、肺结核分枝杆菌载量明显减少,肺组织病变范围小、结核分枝杆菌数量少。另外,TAT-Ag85B增强巨噬细胞表面分子CD80/CD86的表达。结论 TAT-Ag85B蛋白疫苗增强巨噬细胞的抗原提呈能力,诱导小鼠产生强烈的Th1免疫应答,有一定的抗结核分枝杆菌保护作用。
【作者单位】： 安徽理工大学医学院免疫与检验教研室;安徽理工大学免疫与感染研究所;安徽理工大学附属医院检验科;
【基金】：国家自然科学基金(81302524,81202294,81172778) 安徽省自然科学基金(1208085QH162,KJ2013A105,2013SQRL029ZD)
【分类号】：R392
【正文快照】： 近年来,结核病的发病率和死亡率呈上升趋势[1],研究更有效的疫苗是控制结核病的主要途径。85B抗原(antigen 85B,Ag85B)是结核分枝杆菌属(Mycobacterium tuberculosis,MTB)分泌的、具有强烈免疫原性的蛋白质[2-3],并且对MTB感染的小鼠肺部有一定的保护效应[4]。但是,单纯Ag85B

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 刘芳;杨华;周文江;秦波音;范小勇;王德成;;气雾攻击法感染结核病小鼠模型的建立及其综合评价[J];中国实验动物学报;2012年01期

2 陈丽萍;张荣波;胡东;吴静;张金凤;吴汉霞;李昕;牛凯;;T-bet佐剂对Ag85B抗结核DNA疫苗的免疫调节[J];细胞与分子免疫学杂志;2012年07期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前8条

1 Sheikh Mohammad Fazle Akbar;Mamun Al-Mahtab;Mohammad Helal Uddin;Md. Sakirul Islam Khan;;HBsAg, HBcAg, and combined HBsAg/HBcAg-based therapeutic vaccines in treating chronic hepatitis B virus infection[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2013年04期

2 张雷;杨小康;胡东;吴静;王文洋;杜久伟;许礼发;张荣波;;独立表达Ag85A与ESAT6的抗结核DNA疫苗的构建[J];广东医学;2013年20期

3 杨小康;戴京京;祁真玉;郝帅;王干勋;王立宇;胡东;张荣波;;不同形态的烟曲霉对巨噬细胞自噬水平的影响[J];中国微生态学杂志;2014年05期

4 胡东;杨小康;吴静;王干勋;王文洋;祁真玉;陈功;张荣波;;LC3-LpqH自噬靶向性抗结核DNA疫苗的制备[J];细胞与分子免疫学杂志;2014年06期

5 梁艳;吴雪琼;李宁;白雪娟;余琦;阳幼荣;张俊仙;史迎昌;王兰;;结核分枝杆菌感染小鼠模型的建立与评价[J];中国病原生物学杂志;2014年09期

6 胡东;杨小康;王婉;邢应如;王文洋;杜昭弘;尤其;章力;陈丽萍;吴静;张荣波;;pCMV-LC3-Ag85B重组质粒DNA疫苗对结核的免疫保护作用[J];细胞与分子免疫学杂志;2014年11期

7 胡东;杨小康;陈功;吴静;王婉;戴京京;陈天义;张荣波;;LC3-LpqH增强Ag85B抗结核分枝杆菌DNA疫苗的免疫保护作用[J];细胞与分子免疫学杂志;2014年12期

8 宁欣;;吸烟对大鼠免疫系统功能的影响[J];中国医药导报;2014年33期

中国硕士学位论文全文数据库 前4条

1 郭艳涛;基于人乳头瘤病毒16型L2的新型宫颈癌预防性疫苗研究[D];北京工业大学;2013年

2 马玢;牛分枝杆菌免疫优势抗原基因的克隆表达及纳米疫苗初步研究[D];宁夏大学;2013年

3 丁桂兰;基质金属蛋白酶-9在结核性脑膜炎小鼠中的表达特点及意义[D];南昌大学;2014年

4 王文洋;TAT-Ag85B蛋白疫苗辅以T-bet佐剂抗结核效应研究[D];安徽理工大学;2014年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 华树成;李丹;杨明;;应用自动雾化吸入感染装置建立肺结核实验动物模型[J];吉林大学学报(医学版);2008年06期

2 李任翔;刘先洲;唐志佼;鲜巧阳;王勇;张晶;;结核分枝杆菌急性感染小鼠模型的建立[J];公共卫生与预防医学;2007年05期

3 杨春;何永林;徐蕾;张黎;伊正君;李娜;王渝伟;;滴鼻途径建立鼠结核病模型的探讨[J];四川动物;2010年01期

4 徐建;陆宇;郑梅琴;付雷;赵伟杰;王彬;李們;;气溶胶感染小鼠急性结核病模型的建立及应用[J];中国防痨杂志;2010年08期

5 张交儿;周向梅;孙斌;尹晓敏;杨建民;赵德明;;结核分枝杆菌感染实验模型[J];中国实验动物学报;2008年05期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 徐万祥;蛋白疫苗缓释体系研究概况[J];生殖医学杂志;1996年02期

2 马中瑞;韩东雷;赵骏菲;陈梦琳;陈敏;;利用大肠杆菌生产N-糖蛋白和糖蛋白疫苗的研究进展[J];中国生物工程杂志;2013年11期

3 潘芹芹,崔毓桂,龚光明,吉传义,潘勇,王兴海;LHRH融合蛋白疫苗对性成熟前小鼠性腺轴系的影响[J];中华男科学杂志;2005年08期

4 郑丽舒;段招军;;A型流感病毒M2蛋白疫苗的研究进展[J];病毒学报;2006年06期

5 李文桂;陈雅棠;;猪带绦虫45W蛋白疫苗的研制现状[J];中国病原生物学杂志;2012年03期

6 张冉,易新元,曾宪芳,张顺科,蔡春,Larry McReynolds;日本血吸虫Rho GTPase DNA疫苗及重组蛋白疫苗免疫保护机制初探[J];中国寄生虫病防治杂志;2004年05期

7 宋娟;郭卫;柴景蕊;由振东;路长林;;可卡因-苯丙胺调节转录肽蛋白疫苗在吗啡镇痛及其耐受中的作用[J];第二军医大学学报;2008年04期

8 任继玲;王华;杨明;王丽;吴秀丽;王丽颖;于永利;;人乳头瘤病毒重组蛋白疫苗的计算机辅助设计及真核表达[J];细胞与分子免疫学杂志;2010年01期

9 吴婷;欧山海;程通;何水珍;伍小路;郑舟;张军;夏宁邵;;戊型肝炎病毒重组颗粒性蛋白疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答研究[J];病毒学报;2005年06期

10 郝建军;;亚单位糖蛋白疫苗免疫动物后原发无症状单纯疱疹病毒感染的检测[J];国外医学(微生物学分册);1990年06期

中国重要会议论文全文数据库 前4条

1 陈娟娟;;蛋白疫苗中佐剂应用进展[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年

2 潘芹芹;崔毓桂;贾悦;王兴海;;LHRH融合蛋白疫苗对性成熟前小鼠性腺轴系的影响[A];第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会论文汇编[C];2007年

3 何晓文;章亚男;何颖;李凯;姜磊;孙树汉;;乙肝DNA疫苗联合基因工程蛋白疫苗提高免疫效果的研究[A];首届长三角科技论坛——长三角生物医药发展论坛论文集[C];2004年

4 张淑芳;张吉凤;高航;马吉春;台桂香;;重组人MUC1-MBP融合蛋白诱导小鼠Th1活化[A];第九届全国肿瘤生物治疗学术会议论文集[C];2006年

中国重要报纸全文数据库 前2条

1 本报记者 董长青;万克森：研制适合国人的蛋白疫苗[N];北京日报;2011年

2 彭勇;治疗性疫苗有望打破乙肝免疫耐受[N];南方日报;2005年

中国博士学位论文全文数据库 前9条

1 宋欣欣;提高HPV融合蛋白疫苗疗效策略研究[D];中国协和医科大学;2010年

2 刘波;双功能HPV治疗性融合蛋白疫苗的抗癌作用实验研究[D];中国协和医科大学;2008年

3 王秀丽;hCGβ-C3d3融合蛋白疫苗的体液免疫效应及其抗生育潜能[D];复旦大学;2004年

4 方芳;重组MUC1-MBP融合蛋白疫苗抗肿瘤作用机制研究[D];吉林大学;2010年

5 曾瑞红;RSV重组蛋白疫苗的制备及其免疫原性和保护性研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2006年

6 章宏海;热激蛋白HSP70融合蛋白疫苗的抗肿瘤作用研究以及HSP70在免疫调控中的作用[D];复旦大学;2006年

7 谭光宏;重组异种endoglin蛋白疫苗抗肿瘤作用研究[D];四川大学;2004年

8 李金耀;通过共免疫鼠卵透明带3 DNA和蛋白疫苗技术增强免疫不孕效果及降低卵巢炎症反应的研究[D];新疆大学;2007年

9 李晓楠;手足口病新型疫苗的初步研究[D];内蒙古农业大学;2010年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 任继玲;口蹄疫重组蛋白疫苗的计算机辅助设计及功能研究[D];吉林大学;2007年

2 宋娟;可卡因—苯丙胺调节转录蛋白疫苗对吗啡诱导的小鼠条件性位置偏爱的影响[D];第二军医大学;2007年

3 赵莉群;重组金黄色葡萄球菌肠毒素B蛋白疫苗的制备及免疫效果评价[D];西北农林科技大学;2011年

4 赵明丽;DNA疫苗预敏蛋白疫苗增强策略对乙型肝炎病毒表面抗原蛋白免疫应答的影响[D];南京医科大学;2009年

5 崔珂;CpG ODN对口蹄疫重组蛋白疫苗增效作用的研究[D];吉林大学;2010年

6 黄智勇;纳米氢氧化铝吸附抗淋病LTB-PorB重组蛋白疫苗的免疫活性研究[D];南华大学;2011年

7 张璐思;B群脑膜炎球菌重组LTB-NspA融合蛋白疫苗免疫活性及保护作用的初步研究[D];南华大学;2014年

8 李岱容;肺炎链球菌蛋白疫苗ClpP免疫保护效果的实验研究[D];重庆医科大学;2009年

9 戴志兵;抗淋病LTB-PorB核酸疫苗与重组蛋白疫苗联合免疫的免疫增强效应研究[D];南华大学;2010年

10 王文洋;TAT-Ag85B蛋白疫苗辅以T-bet佐剂抗结核效应研究[D];安徽理工大学;2014年

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本文编号：1165040