激活素A和脂多糖对小鼠腹腔巨噬细胞的活化作用及其机制研究

发布时间：2017-11-11 08:35

  本文关键词：激活素A和脂多糖对小鼠腹腔巨噬细胞的活化作用及其机制研究

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【摘要】：激活素A属于转化生长因子β（TGF-β）超家族成员之一，由于其具有抑制细菌内毒素脂多糖（LPS）活化巨噬细胞作用，又被称作免疫抑制素P（restrictin-P）。本研究室前期研究证实，LPS可以刺激巨噬细胞活化并产生高水平激活素A，激活素A又可以抑制LPS活化巨噬细胞功能，但激活素A抑制LPS活化巨噬细胞功能的机制尚不明确。因此，本研究通过体外实验和体内实验，进一步探讨激活素A和LPS对小鼠腹腔巨噬细胞活性的影响及其可能的作用机制。 1.激活素A和LPS对体外培养小鼠腹腔巨噬细胞活性的影响 本研究首先检测了巨噬细胞分泌和吞噬功能。结果显示，LPS能明显促进体外培养小鼠腹腔巨噬细胞分泌IL-1β、IL-10、TNF-α和NO；激活素A能促进IL-10和NO分泌，而对IL-1β、TNF-α分泌无明显影响。激活素A和LPS联合作用时，能抑制LPS活化小鼠腹腔巨噬细胞分泌IL-1β、IL-10、TNF-α和NO。激活素A和LPS单独作用时，均能促进巨噬细胞吞噬活性；但联合作用时，激活素A同样能抑制LPS活化小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性。 为了探讨激活素A调控活化巨噬细胞的机制，研究检测了巨噬细胞表面TLR2、TLR4及CD14表达水平。结果显示，LPS能明显上调体外培养小鼠腹腔巨噬细胞表面TLR2、TLR4和CD14表达，而激活素A对TLR2、TLR4和CD14表达几乎没有影响。但二者联合作用时，激活素A能明显下调LPS活化巨噬细胞表面TLR4表达，而对TLR2及CD14表达没有明显的抑制作用。 2.激活素A和LPS在体内对小鼠腹腔巨噬细胞活性的影响 由于机体接触抗原异物活化巨噬细胞都发生在体内，所以，为了确定在体内激活素A和LPS对巨噬细胞功能的调控，实验通过体内活化巨噬细胞，，继续对体外明显变化的指标进行检测。研究发现，LPS单独作用时小鼠腹腔液中IL-10、TNF-α和NO水平明显升高，激活素A对TNF-α水平没有明显影响。联合作用时，激活素A则能显著抑制LPS诱导的IL-10、TNF-α和NO产生。激活素A和LPS在体内也能促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性；但联合作用时，激活素A也表现出抑制LPS活化小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性。LPS在体内也能够明显上调小鼠腹腔巨噬细胞表面TLR2、TLR4及CD14表达，激活素A则能明显下调LPS活化小鼠腹腔巨噬细胞表面TLR4的表达，而对TLR2及CD14的表达没有明显的抑制作用。 综上所述，激活素A在体外、体内均能直接刺激巨噬细胞活化，但其刺激活化的巨噬细胞分泌细胞因子与LPS活化巨噬细胞分泌的细胞因子不同，可能与二者活化的巨噬细胞类型有关。另一方面，激活素A在体外、体内均能抑制LPS活化巨噬细胞功能，同时显示激活素A能抑制LPS活化巨噬细胞表达TLR4，提示激活素A可能通过抑制LPS-TLR4途径下调LPS活化巨噬细胞功能。上述研究提示，激活素A可能在炎症应答早期通过促进巨噬细胞吞噬功能增强机体防御能力，而在炎症应答晚期通过抑制巨噬细胞过度活化，防止组织损伤，在巨噬细胞参与的炎症应答调控中具有极其重要的意义。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R392

【参考文献】

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本文编号：1170638