STR图谱法从疫苗成品中鉴别生产用人源细胞株的研究

发布时间：2017-11-11 17:20

  本文关键词：STR图谱法从疫苗成品中鉴别生产用人源细胞株的研究

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【摘要】：目的:探讨采用短串联重复序列(STR)图谱分析法检测人二倍体细胞生产的疫苗成品,判定生产所用细胞基质种类的可能性,为疫苗的质量控制及监测等环节提供参考。方法:研究用疫苗均以人二倍体细胞为生产基质,品种包括水痘减毒活疫苗、甲肝减毒活疫苗、麻疹风疹联合减毒活疫苗、甲肝灭活疫苗、狂犬灭活疫苗,分别来自11个厂家共22批。其中甲肝灭活疫苗均经过纯化,且均以甲醛为灭活剂。狂犬灭活疫苗来自2个厂家,1家疫苗采用了柱层析纯化工艺,2家疫苗均以β-丙内酯为病毒灭活剂。首先提取疫苗成品中的DNA,然后采用STR图谱分析方法对DNA进行检测,并对所获得的指纹图谱与标准图谱数据进行比对,判定生产所用细胞的正确性。结果:对减毒活疫苗进行检测可准确地判定生产用细胞的种类,结果显示8家疫苗生产企业中1家使用了错误的细胞。在对灭活疫苗的检测中,无柱层析纯化工艺的狂犬灭活疫苗可得到良好的STR数据,且比对结果正确。经柱层析的狂犬灭活疫苗经酚抽提法提取的DNA检测可获得STR信号,尽管Penta E位点信号缺失也可判定出生产所用的细胞基质种类及正确性。含有铝佐剂的甲肝灭活疫苗检测均未获得STR图谱数据。进一步对2种病毒灭活剂进行初步分析,结果显示:利用β-丙内酯进行病毒灭活,对疫苗中STR检测存在干扰,甲醛灭活对检测无明显影响。结论:利用STR图谱分析法能够直接从人二倍体细胞生产的减毒活疫苗和不含铝佐剂的灭活疫苗中鉴别生产所用的细胞基质种类,可为疫苗生产的质量控制及监测等环节提供参考。
【作者单位】： 中国食品药品检定研究院生物制品检定所细胞资源保藏研究中心卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室;内蒙古包头市肿瘤医院;
【基金】：国家863计划-疫苗效果和质量评价新技术研究((2012AA02A402);国家863计划-肿瘤的细胞治疗性疫苗及免疫性疾病细胞治疗关键技术研究(2012AA020902) 国家实验细胞资源共享平台(NSTI-CR14)
【分类号】：R392-33
【正文快照】： *国家863计划-疫苗效果和质量评价新技术研究((2012AA02A402);国家863计划-肿瘤的细胞治疗性疫苗及免疫性疾病细胞治疗关键技术研究(2012AA020902);国家实验细胞资源共享平台(NSTI-CR14)生产用细胞基质是病毒性疫苗生产的重要起始材料,目前我国已批准的病毒性疫苗生产所用的细

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本文编号：1172343