基于IL-4探讨针刀松解法干预KOA模型兔的力学信号传导机制的研究
发布时间:2017-11-12 11:09
本文关键词:基于IL-4探讨针刀松解法干预KOA模型兔的力学信号传导机制的研究
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【摘要】:研究目的 本研究通过观察针刀松解法干预膝骨关节炎(KOA)模型兔髌韧带力学变化对软骨中IL-4表达的影响,以及对关节软骨损伤修复的影响,力求初步探索出基于IL-4的针刀松解法干预KOA模型兔促使软骨损伤修复的力学信号传导机制,为针刀治疗膝骨关节炎的临床应用提供依据和指导。 研究方法 40只正常新西兰兔(6月龄,雌雄各半,体重2.25±0.1kg)随机分成四组,分别为空白组、模型组、电针组、针刀组。采用左后肢伸直位固定制动法制备膝骨关节炎兔模型,制动6周后,取材,测髌韧带拉伸、应力松弛和蠕变力学特性,分析兔KOA髌韧带在针刀松解法干预前后的力学变化;用ELISA方法检测膝关节软骨中白介素-4的含量,分析针刀松解法改善髌韧带力学特性后,对软骨中IL-4含量变化的影响;对各组兔关节软骨进行形态学观察,分析针刀松解法改善髌韧带力学特性后,对软骨损伤程度的改善情况。 研究结果 1髌韧带的松弛和蠕变实验结果:从应力松弛率和蠕变率的分析看,四组之间应力松弛率和蠕变率有显著性差异(P0.05),针刀松解组的应力松弛率小于模型组,有显著性差异(P0.05),模型组的应力松弛率大于正常对照组,有显著性差异(P0.05);针刀松解组和空白组比较有显著性差异(P0.05)电针组与模型组相比较,无显著性差异(P0.05) 针刀松解组蠕变率大于模型组,两组之间有显著性差异(P0.05),模型组的蠕变率小于正常对照组,有显著性差异(P0.05),针刀松解组和空白组比较有显著性.差异(P0.05);电针组与模型组相比较有显著性差异(P0.05);从结果可以看出KOA模型髌韧带应力松弛和蠕变特性都有所变化,通过对髌韧带2小时的蠕变和应力松弛的测试也.可以看出,针刀松解组的应力松弛和蠕变曲线处于空白组和模型组之间,但更接近于正常组的曲线,提示针刀松解法可以有效恢复其应力松弛和蠕变的粘弹性特性。在拉伸力学测试中,四组最大应力、最大位移和弹性模量都有统计学意义(P0.05; P0.01),而最大应变无统计学意义(P0.05)。两两比较,针刀松解组最大应力与模型组相比有显著性差异(P0.05),与空白组之间有显著性差异(P0.05),模型组和空白组之间有极显著性差异(P0.01);针刀松解组的最大位移与模型组相比有显著性差异(P0.05),与空白组比较,有显著性差异(P0.05),模型组和空白组之间有显著性差异(P0.05);针刀松解组与电针组的弹性模量与模型组相比均有极显著性差异(P0.01),与空白组比较有显著性差异(P0.05)模型组和空白组之间有极显著性差异(P0.01)。从结果可以看出模型组髌韧带的拉伸力学特性有很大的改变,而针刀松解法可以有效改善这种拉伸力学特性。 2ELISA检测兔KOA软骨中白介素-4水平的结果表明:模型组软骨中IL-4的含量显著低于正常对照组,具有极显著性差异(P0.01);针刀松解组软骨中IL-4的含量高于模型组,具有显著性差异(p0.05);针刀松解组中IL-4的含量低于空白组,具有显著性差异(p0.05),电针组软骨中IL-4的含量高于模型组,有显著性差异(p0.05);针刀松解组中IL-4的含量高于电针组,有显著性差异(p0.05);从结果可以看出,针刀松解法改善韧带力学变化后,软骨中白介素-4含量较模型组和电针组相比逐渐升高,趋于正常组,提示白介素-4在软骨修复中起重要作用。 3关节软骨光镜观察结果:空白组兔膝关节软骨厚度正常,软骨表面光滑,多层次细胞排列整齐及形态均正常,基质无退变,潮线清晰,无血管翳生成,且下骨组织无异常。模型组软骨细胞变性、坏死,软骨表面不光滑,仅见个别残存软骨细胞,细胞排列明显不规则,层次紊乱,剥脱缺损深达潮线,软骨细胞巢居,潮线模糊或见双重潮线,部分软骨有血管通过和血管翳生成。针刀松解组软骨细胞排列整齐,潮线清晰,软骨表层比较光滑,未见血管翳形成。电针组软骨细胞表面较光滑,着色尚均匀,软骨细胞排列较整齐,偶见多个软骨细胞聚集一起,细胞核浓缩。表层细胞坏死、剥脱,无血管翳形成。对各组切片按照Mank in法进行评分,结果经统计分析,四组评分总体差别显著(P0.01)。两两比较,针刀松解组的软骨损伤程度优于模型组,具有极显著差异(P0.01),与空白组比较有差异(P0.05),与电针组相比有差异(P0.05);电针组与空白组相比,差异显著(P0.01),与模型组相比无显著差异(P0.05)模型组与空白组比较有极显著差异(P0.01)。提示针刀松解法可以改善软骨的损伤和退变程度,但未达到正常水平 研究结论 针刀松解法通过对膝关节髌韧带的松解粘连,有效调整了关节韧带的生物力学特性,恢复了膝关节处的力学平衡,而外周力学平衡改善的同时对软骨中IL-4的表达产生影响,同时对关节软骨损伤起到了修复和改善的作用,因此我们认为,针刀松解法改善韧带力学变化后,通过力学信号的转导发挥软骨保护治疗的作用,而IL-4所介导的软骨细胞力学信号转导通路则是其中关键的一条,这可能是针刀松解法治疗KOA的力学信号传导机制之一
【学位授予单位】:北京中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R245;R-332
【参考文献】
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本文编号:1175639
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