慢病毒介导TGF-β1基因诱导大鼠骨髓间充质干细胞成软骨细胞分化

发布时间：2017-11-14 19:36

  本文关键词：慢病毒介导TGF-β1基因诱导大鼠骨髓间充质干细胞成软骨细胞分化

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【摘要】：[目的]探讨慢病毒介导转化生长因子β1(tansforming growth factor bata 1,TGF-β1)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)诱导成软骨细胞分化的作用。[方法]密度梯度离心法分离培养BMSCs,探索病毒感染最佳条件,取第3代细胞,分为实验组和对照组,通过慢病毒载体将外源性TGF-β1基因转染入细胞,观察绿色荧光表达情况,Real-time PCR法和western blot法检测TGF-β1基因的mRNA和蛋白表达情况,7、14 d时行Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色、甲苯胺蓝染色和Real-time PCR检测Ⅱ型胶原及聚集蛋白聚糖的表达。[结果]TGF-β1基因转染BMSCs后能够稳定表达。转染7、14 d时,实验组免疫细胞化学染色、甲苯胺蓝染色均为阳性。转染7、14 d时,实验组II型胶原mRNA均显著高于对照组(P0.01)。转染7 d时,实验组聚集蛋白聚糖mRNA变化不明显,而14 d时显著高于对照组(P0.01)。[结论]慢病毒介导的TGF-β1基因可成功转染大鼠BMSCs,并诱导其向软骨细胞分化。在此过程中软骨特异性标志Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的mRNA表达具有时间差异性。
【作者单位】： 浙江中医药大学;浙江中医药大学附属第一医院;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(编号:81373669) 浙江省重点科技创新团队计划资助项目(编号:2011R50022-01) 浙江省重点实验室计划资助项目(编号:2013E10024)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 各种原因造成的关节软骨损伤及缺损是骨科医生面临的一大难题。由于关节软骨自身修复能力很差,一旦损伤,很难自行修复。而传统的外科手术、软骨移植等治疗手段并不能完全恢复软骨原有结构和功能,且软骨移植还受到细胞来源的限制[1]。因此人们对软骨损伤修复的研究逐渐转向了成

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1 孙琼;焦顺昌;;非小细胞肺癌疫苗治疗的现状[J];解放军医学院学报;2014年04期

2 郭平;王升启;;四物汤及活性单体对血虚证小鼠骨髓细胞NF-κB和TGF-β_1基因表达的影响[J];山东中医药大学学报;2013年04期

3 潘素飞;任霞;史美燕;禹林昌;张之勇;姜国胜;;PMA诱导K562细胞向单核细胞分化机制探讨[J];中华肿瘤防治杂志;2014年14期

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3 潘素飞;Egr-1和WT1优势结合TGF-β1在白血病细胞分化为单核/巨噬细胞过程中的作用[D];济南大学;2014年

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1 颜炜群,杨同书;软骨细胞分化调节的分子机制研究进展[J];细胞生物学杂志;1993年03期

2 张亚,王晓东,张德强,刘新晖,王科文,张锡庆;诱导人骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究[J];实用全科医学;2004年02期

3 颜炜群,杨同书,候立中,铃木不二男,加藤幸夫;伴刀豆蛋白A促进培养的静止软骨细胞分化[J];实验生物学报;1994年04期

4 裴明,曲绵域,于长隆;亡在软骨细胞分化调节中的作用[J];中华外科杂志;1998年11期

5 贾本让,张钦,孙正义,吴萌;骨髓间充质干细胞体外定向软骨细胞分化的研究[J];实用骨科杂志;2004年05期

6 李秀森 ,郭子宽 ,刘晓丹 ,侯春梅 ,毛宁;人骨髓间充质干细胞的培养及向软骨细胞分化[J];解放军医学杂志;2002年12期

7 王武愉;张亚;王晓东;;诱导兔骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究[J];实用全科医学;2008年05期

8 谢峰;张文杰;丛笑倩;陆峻泓;曹谊林;;共培养诱导小鼠ES细胞向软骨细胞分化的初步研究[J];组织工程与重建外科杂志;2005年03期

9 王凡,刘德鸿,李瑞祥,羊惠君,唐耘熳;转化生长因子-β(TGF-β)对骺板肥大区软骨细胞分化作用的研究[J];中国口腔种植学杂志;1998年04期

10 吕学敏,杨庆铭,邓廉夫;WNT家族在脊椎动物骨骼发育中的作用机制[J];遗传;2004年06期

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1 许圣荣;赵劲民;蒋宗滨;;骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究[A];第十五次长江流域麻醉学学术年会暨2010年中南六省麻醉学学术年会暨2010年湖北省麻醉学学术年会论文集[C];2010年

2 陈金武;王常勇;吴军正;郭希民;段翠密;董灵芝;;关节腔环境诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究[A];中国生物医学工程学会第六次会员代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2004年

3 郑朝晖;朱平;李晓燕;尚鹏;王彦宏;樊春梅;贾俊峰;;骨髓间充质干细胞的分离培养及体内外诱导其向软骨细胞分化[A];第十届全国风湿病学学术会议论文集[C];2005年

4 胡煜;罗阳;曹丽华;高锦兰;李宝坤;;GDF5基因突变影响软骨细胞分化机制的研究[A];第八次全国医学遗传学学术会议(中华医学会2009年医学遗传学年会)论文摘要汇编[C];2009年

5 肖军;史占军;;RE-1元件辅助抑制因子对骨关节炎软骨细胞分化的调控作用[A];第20届中国康协肢残康复学术年会论文选集[C];2011年

6 毛艳;张西正;;机械拉伸诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究[A];天津市生物医学工程学会2006年学术年会论文摘要集[C];2006年

7 田娟;吕社民;;长期低剂量T-2毒素对软骨细胞分化关键基因表达的影响[A];第七届全国医学生物化学与分子生物学和第四届全国临床应用生物化学与分子生物学联合学术研讨会暨医学生化分会会员代表大会论文集[C];2011年

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1 杨礼庆;胰岛素样生长因子-1基因转染对兔骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的影响[D];中国医科大学;2006年

2 王万宗;体外三维培养条件下转化生长因子β1基因转染的兔骨髓间充质干细胞促成软骨细胞分化的实验研究[D];第二军医大学;2006年

3 孙冬梅;决定骨骼发育的转录因子的转录调控机制的研究[D];东北师范大学;2009年

4 孙长英;ERα和ERβ在调控椎体生长板软骨细胞分化和增殖中的相互作用[D];中南大学;2014年

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1 焦强;人骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究[D];山西医科大学;2004年

2 毛艳;力学作用对骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化影响的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2006年

3 林天;力学刺激对骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的研究[D];大连医科大学;2012年

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7 林增平;不同力学刺激对人BMSCs向软骨细胞分化的实验研究[D];福建医科大学;2009年

8 熊奎州;猪骨髓基质细胞的分离培养及向软骨细胞分化的研究[D];西北农林科技大学;2008年

9 李祥柱;Ad-IRE1α腺病毒载体的构建及对软骨细胞分化与凋亡的效应研究[D];重庆医科大学;2012年

10 李中华;兔间充质干细胞分离培养和体外向软骨细胞分化的实验研究[D];山东大学;2008年

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本文编号：1186764