钙离子激活钾通道和内向整流钾电流对人外周血内皮祖细胞分化的影响
发布时间：2017-11-19 06:21
本文关键词：钙离子激活钾通道和内向整流钾电流对人外周血内皮祖细胞分化的影响
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【摘要】：内皮祖细胞（Endothelial progenitor cells, EPCs）能定向分化为成熟内皮细胞（Endothelial cells, ECs）；在体内，，EPCs能加强血管新生作用，修复梗死的心肌区域。通过全细胞膜片钳技术，在EPCs中已经发现了许多离子通道，如钙离子激活的钾离子通道（KCa）、内向整流钾电流（Kir）、容量敏感性的氯离子通道（ICl.vol）等等。本课题将探索：①在EPCs定向分化过程中哪种离子通道起到的作用最为关键；②该离子通道在EPCs定向分化过程中起到何种作用；③在mRNA和蛋白质水平，检测该离子通道亚型在EPCs定向分化过程中的表达。我们用密度梯度离心法分离出正常成人外周血中的单个核细胞层，内皮祖细胞条件培养基进行培养。当EPCs充分分化为成熟内皮细胞后，流式细胞检测CD133阳性细胞的表达比例，结果显示几乎不表达（0.44±0.20%，N=6）；而加入四乙基胺（Tetraethylammonium, TEA,阻滞钾离子通道）后，CD133+细胞的表达比例明显提高（25.50±7.55%，N=6）。体外血管形成实验中，我们发现加入TEA后，充分分化后的EPCs成管不佳，且无细胞间的相互连接。在mRNA和蛋白质水平，我们检测到三个钾离子通道亚型的表达，分别是KCNN4编码的中电导钙离子激活的钾电流（IKCa）、KCNNMA1编码的大电导钙离子激活的钾电流（BKCa）和Kir3.4编码的内向整流钾电流（kir）。这些结果第一次揭示了在EPCs定向分化过程中，钾离子通道起到至关重要的作用；且这个作用可能是促进EPCs定向分化为成熟内皮细胞；起作用的钾离子通道亚型可能是IKCa, BKCa和Kir3.4。
【学位授予单位】：宁波大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R329.2
【共引文献】
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