钙激活氯通道ANO1在小鼠心肌细胞的表达及其功能鉴定

发布时间：2017-11-24 05:25

  本文关键词：钙激活氯通道ANO1在小鼠心肌细胞的表达及其功能鉴定

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【摘要】：目的:探讨钙激活氯通道蛋白anoctamin 1(ANO1)在小鼠原代培养心肌细胞中的表达及其功能特性。方法:采用胰酶与胶原酶共同消化,联合2次差速贴壁法获得C57BL/6小鼠原代心肌细胞;并用免疫荧光染色法检测α-横纹肌肌动蛋白,以鉴定心肌细胞纯度;应用RT-PCR检测小鼠心肌细胞ANO1 mRNA的表达;免疫印迹检测ANO1蛋白在小鼠心肌细胞的表达情况;应用荧光淬灭动力学实验检测ANO1钙激活氯通道的功能特性。结果:RT-PCR结果表明原代培养的小鼠心肌细胞表达ANO1 mRNA。免疫印迹实验结果显示原代培养的小鼠心肌细胞表达ANO1蛋白。荧光淬灭动力学实验证实表达于小鼠心肌细胞的ANO1具有钙激活氯通道典型的阴离子转运功能特性。结论:ANO1在小鼠心肌细胞中有明确表达,并具有钙激活氯离子通道特性,提示ANO1是钙激活氯通道的分子基础。
【作者单位】： 吉林医药学院临床生物化学检验教研室;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81202031) 吉林省教育厅基金资助课题(No.2013351) 2014年吉林省大学生创新创业训练计划 2013年吉林省大学生创新创业训练计划 吉林医药学院大学生科研基金资助课题(吉医学科字[2012]第12号)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 钙激活氯通道(calcium-activated chloride chan-nels,Ca CCs)是心肌主要的氯离子通道之一,与心肌细胞的电活动关系密切。Ca CCs不仅参与心肌静息电位的形成及动作电位的复极化过程,并且在急性心肌缺血、再灌注、心力衰竭等病理状态下,Ca CCs异常激活,形成瞬间内向电流,产生异

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本文编号：1221187