慢病毒载体介导的COX-2基因沉默在人骨髓间充质干细胞中的表达及对干细胞定向分化能力影响的研究

发布时间：2017-11-25 07:56

  本文关键词：慢病毒载体介导的COX-2基因沉默在人骨髓间充质干细胞中的表达及对干细胞定向分化能力影响的研究

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【摘要】：[背景]：目前,COX-2基因沉默在干细胞中的研究还处在初级阶段。 [目的]：构建携带COX-2基因沉默的慢病毒载体,观察其在人骨髓间充质干细胞中的表达,以及其定向分化潜能变化情况。 [方法]：应用重组慢病毒技术构建携带沉默COX-2基因和绿色荧光蛋白的慢病毒载体,并用其转染体外培养第3代的人骨髓间充质干细胞,以无目的基因的慢病毒转染入骨髓间充质干细胞和未做处理的人骨髓间充质干细胞分别作为阴性对照组和空白组进行对比。转染后7天分别提取各组细胞的总RNA和蛋白检测COX-2表达量。对COX-2基因沉默的人骨髓间充质干细胞和正常人骨髓间充质干细胞定向诱导,观察COX-2基因沉默对入骨髓间充质干细胞成脂、成骨、成软骨能力的影响。 [结果与结论]：慢病毒转染3d后,荧光显微镜下可见人骨髓间充质干细胞发出绿色荧光,阴性对照组转染效率可达90%以上,实验组转染效率达85%以上。RT-PCR和Western blot检测结果显示,COX-2基因在人骨髓间充质干细胞中的基因水平和蛋白水平均得到了明显抑制。COX-2基因转染对人骨髓间充质干细胞成脂、成骨、成软骨能力无明显影响。
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R329.2

【参考文献】

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本文编号：1225265