亚抑菌浓度β-内酰胺类抗生素对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响研究

发布时间：2017-12-05 12:30

  本文关键词：亚抑菌浓度β-内酰胺类抗生素对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响研究

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【摘要】：目的：研究亚抑菌浓度(subminimal inhibitory concentration,sub-MIC)抗生素对细菌生物膜形成的影响,为探讨细菌生物膜形成的调控机制及发现新的药物靶点提供理论及实验依据。方法：选取铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)的临床分离菌株(PA.11、 PA.12、PA.14)和标准菌株(PAO1、ATCC27853)。采用微量肉汤稀释法测定亚胺培南西司他丁钠(IM/CI)、头孢他啶(CAZ)、哌拉西林舒巴坦钠(P/S)、头孢曲松钠(CRO)、头孢噻肟(CTX)、阿莫西林氟氯西林钠(A/F)的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。分别将1/2MIC、1/4MIC、1/8MIC抗生素作用于PA,通过细菌黏附力试验了解抗生素对细菌黏附力的影响。选用1/4MIC抗生素作用于PA.12,通过运动试验、菌落计数法、结晶紫染色法及激光共聚焦显微镜(Confocal LaserScanning Microscope, CLSM)观察1/4MIC抗生素对PA.12生物膜形成的影响,同时采用RT-PCR对生物膜形成相关基因algC、alg D进行检测分析。结果：1.细菌黏附力试验结果显示：(1)1/2MIC IM/CI、CAZ、P/S、CRO、CTX能增强PA.11的黏附力,1/2MIC CAZ、CTX能增强PAO1的黏附力,1/2MIC A/F均能增强5株PA的黏附力(p≤0.05)。(2)除1/4MIC CAZ对PA.14黏附力无影响外,其余1/4MIC、1/8 MIC抗生素均能增强PA黏附力(p≤0.05)。2.选取1/4MIC抗生素作用于PA.12,与无药对照组比较：(1)运动试验结果显示：1/4MIC IM/CI、CRO、CTX能增强PA.12的游动能力(p≤0.05);1/4MIC M/CI、CAZ, P/S、CRO、A/F能增强PA.12的群集运动能力(p≤0.05)。(2)菌落计数法结果显示1/4MICIM/CI、P/S、CRO、CTX组PA.12活菌数量明显增多(p≤0.05)。(3)结晶紫染色法显示1/4MICM/CI、P/S、CRO、CTX能诱导PA.12生物膜形成(p≤0.05)。(4)CLSM观察显示1/4MIC IM/CI、P/S、CRO、CTX诱导PA.12生物膜形成增多,厚度增加。(5)RT-PCR结果显示各抗生素均能增强algC基因表达(p≤0.05),IM/CI、P/S诱导algD基因表达增强(p≤0.05)。结论：1/4MIC IM/CI、P/S、CRO、CTX能诱导PA.12生物膜形成,1/4MIC CAZ、A/F对细菌生物膜形成没有影响；1/4MIC IM/CI、CAZ、P/S、CRO、CTX、A/F对铜绿假单胞菌群体感应(quorum sensing, QS)系统具有调节作用。
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R378.991

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本文编号：1254843