探讨阿糖胞苷在原代大鼠海马神经元培养中的纯化方法

发布时间：2017-12-05 13:22

  本文关键词：探讨阿糖胞苷在原代大鼠海马神经元培养中的纯化方法

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【摘要】：目的探讨阿糖胞苷(Ara-C)在原代大鼠海马神经元早期纯化培养中的优化方法。方法新生1d SD大鼠海马神经元原代培养48 h后,不同浓度(0、2.5、5.0、7.5、10 mmol/L)Ara-C处理0、6、12、24 h,光镜下观察细胞形态,采用MTT检测细胞活性,并通过细胞形态学分析神经元纯度,筛选出最优纯化浓度与时间;采用免疫荧光及Western blot技术检测微管相关蛋白2(MAP2)进一步检测神经元纯度,台盼蓝染色分析神经元存活率。结果大鼠原代海马神经元培养48 h,5 mmol/L Ara-C处理24 h得到的神经元纯度及活性最佳;MAP2免疫荧光染色结果显示,Ara-C处理组神经元纯度为(74.28±10.13)%,显著高于对照组(34.82±8.15)%(P=0.000);Western Blot结果显示Ara-C处理组MAP2蛋白水平显著高于对照组(P=0.008);台盼蓝染色显示Ara-C处理组与对照组间海马神经元存活率无差异,分别为(93.2±3.82)%和(95.6±2.37)%(P=0.109)。结论在大鼠原代海马神经元的早期培养过程中,5 mmol/L Ara-C处理24 h得到的海马神经元的纯度与活性最佳。
【作者单位】： 南方医科大学基础医学院组织胚胎学教研室;南方医科大学珠江医院肾内科;
【基金】：国家自然科学基金(81572222;30900725;81170682) 广东省自然科学基金(2014A030313333)
【分类号】：R338
【正文快照】： 神经元极性是指在绝大多数神经元发育过程中生出有且只有一根轴突及多根树突。神经元极性的建立分为五个阶段[1],神经元贴壁后立即形成板状伪足延展开来(阶段1);6~12 h这些板状伪足发展成四到五根长度约为15~20 mm短小的不成熟突起,在此阶段这些突起无明显差异,无轴突与树突的

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