银花泌炎灵片对大肠埃希菌的抑菌作用及抑菌机理的初步研究

发布时间：2017-12-06 09:21

  本文关键词：银花泌炎灵片对大肠埃希菌的抑菌作用及抑菌机理的初步研究

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【摘要】：银花泌炎灵片是由金银花、半枝莲、扁蓄等组成的纯中药制剂，具有清热解毒，利湿通淋的功效。临床常用于治疗急性肾盂肾炎，急性膀胱炎，下焦湿热证等泌尿系统感染，是目前临床治疗难治性泌尿系统感染的常用药。目前,尚无银花泌炎灵片抑菌机制方面的研究。因此，本文在研究银花泌炎灵片95%乙醇提取物对泌尿系统感染主要致病菌大肠埃希菌抑菌活性的基础上，初步探讨其抑菌的机制，旨在为更好的指导临床用药，制定合理的临床用药方案，提供理论依据和实验数据验证。 本研究采用琼脂稀释法和试管法测定银花泌炎灵片95%乙醇提取物对大肠埃希菌的抑菌活性，其MIC50-90为50～100mg/mL，MBC50-90为100～250mg/mL。通过绘制时间-杀菌曲线（KCs)、电镜观察药物作用后菌体超微结构变化、SDS-PAGE电泳等实验初步探讨其抑菌机理。KCs研究发现银花泌炎灵片95%乙醇提取物延迟了大肠埃希菌的分裂时间，使大肠埃希菌生长周期中的对数生长期延长，同时缩短了平台期，加速其进入衰退期，破坏了细菌正常的生长周期，，从而抑制了细菌的生长繁殖；扫描电子显微镜下可见经银花泌炎灵片95%乙醇提取物作用后大肠埃希菌菌体表面出现塌陷，两端可见凹陷和刺状突起，有的细菌严重变形；负染透射电子显微镜发现药物作用后菌体折光性明显变差，菌体变形出现褶皱，且部分细胞壁出现凹陷；超薄切片透射电子显微镜下观察到药物作用后，菌体固缩膨大，细胞壁模糊不清甚至缺失，细胞质固缩解体,形成小空泡。电镜结果显示其抑菌机制可能是药物干扰或破坏大肠埃希菌细胞壁合成或破坏菌体内大分子量蛋白，以致菌体超微结构出现改变，从而达到抑制或杀灭菌体的目的；SDS-PAGE电泳显示菌体蛋白电泳谱带，对照组和加药组两者呈现显著差别，药物作用后，菌体蛋白条带有5条变浅，分子量170KD和60KD的蛋白质谱带变浅很明显，130KD、100KD和70KD的蛋白质谱带有变化。这种蛋白条带明显改变的现象，提示了银花泌炎灵片95%乙醇提取物可能影响了菌体蛋白的正常表达或影响了其功能，抑制了细菌某些关键的结构或功能蛋白的合成。 综上，银花泌炎灵片95%乙醇提取物对大肠埃希菌具有一定的抑菌活性，其初步抑菌机理可能与其延长细菌的分裂周期，抑制细菌的生长繁殖，同时药物可能干扰或破坏大肠埃希菌细胞壁合成或破坏菌体内大分子量蛋白，以致菌体超微结构出现改变和蛋白质减少。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R378.21;R285

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本文编号：1258098