大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞原代培养方法的改进
本文关键词:大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞原代培养方法的改进
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【摘要】:目的:探索提高大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)原代培养效率和纯度的方法。方法:在原有组织贴块法培育大鼠原代VSMCs的基础上进行改良,分离出胸主动脉后进一步分离中膜,DMEM高糖培养基中加入10μg/L血小板源性生长因子B(PDGF-B)。用细胞形态学及细胞免疫荧光对VSMCs进行鉴定。结果:6 d左右组织块周围有细胞爬出,12 d左右可以传代。镜下见细胞呈梭形,典型"峰谷"状排列生长;免疫荧光鉴定可见大量平滑肌肌动蛋白(SMA),比传统方法获得的细胞纯度高。结论:加入PDGF-B可以缩短大鼠VSMCs原代培养时间,提高效率;剥离中膜可以提高大鼠VSMCs原代细胞的纯度。
【作者单位】: 绍兴市人民医院;浙江大学绍兴医院心内科;温州医科大学第一临床医学院;浙江中医药大学研究生院;
【基金】:浙江省自然科学基金资助项目(LY14H020002) 浙江省卫生高层次创新人才培养工程资助项目(CXRC201201) 浙江省公益技术研究社会发展项目(2012C33040) 绍兴市科技局科研基金资助项目(2013B70072)
【分类号】:R329.2
【正文快照】: 2014-12-15@hotmail.com。基金项目:血管成形术和支架植入术是治疗严重冠状动脉 粥样硬化的主要方法,术后发生血管再狭窄是心血管医师面临的一个棘手的问题[1]。血管平滑肌细胞 (vascular smooth muscle cells,VSMCs)的增殖和迁移以及从已经分化的收缩型表型向未分化的分泌型
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