伯氏疟原虫CSP基因N端蛋白靶向肝细胞的研究

发布时间：2017-12-12 02:25

  本文关键词：伯氏疟原虫CSP基因N端蛋白靶向肝细胞的研究

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【摘要】：目的研究伯氏疟原虫CSP基因的N端蛋白与小鼠肝细胞膜HPSGs受体结合后在体外、体内的肝组织靶向性。方法将伯氏疟原虫CSP基因N端片段(PbCSP-N)克隆入原核表达质粒pET-28α,经IPTG诱导表达重组蛋白,经亲和层析纯化后采用Western blot方法鉴定;采用Pull-down方法检测PbCSP-N蛋白与小鼠肝细胞表面受体硫酸乙酰肝素糖蛋白(Heparan sulfate proteoglycan,HSPG)的结合力;应用免疫组化、放射性碘标记示踪方法检测该蛋白在体外、体内特异性靶向小鼠肝组织作用。结果成功构建PbCSP-N原核表达质粒并表达、纯化出PbCSP-N重组蛋白(15ku),Pull-down方法证实该蛋白可与小鼠肝细胞膜HPSGs受体结合,免疫组化试验显示该重组蛋白定位于正常小鼠肝细胞膜,表明该蛋白可特异结合正常小鼠肝细胞膜;放射性碘(125I)标记示踪显示,标记的重组蛋白在注射1、2、4、6、12h后在小鼠肝脏分布较多,表明该重组蛋白可靶向正常小鼠肝组织。结论伯氏疟原虫CSP基因N端蛋白与肝细胞膜HPSGs受体结合后在体内、外靶向肝细胞,可作为肝细胞靶向性药物候选分子。
【作者单位】： 广州医科大学基础学院病原生物学与免疫学教研室;襄阳市第一人民医院;
【基金】：广州市属高校科技计划项目(No.08A097,No.10A173) 广东省医学科研基金项目(No.B2012165) 广州市重点学科建设项目(No.B127007) 广东省高等教育教学改革项目(No.GDJG20142273)
【分类号】：R382
【正文快照】： ***当感染疟原虫按蚊叮咬中间宿主后,疟原虫子孢子进入宿主血液循环,30min内便可入侵肝细胞[1]。子孢子之所以能迅速特异入侵肝细胞,主要是由于子孢子表面的环子孢子蛋白(Circumsporozoite protein,CSP)能够与肝细胞表面受体硫酸乙酰肝素糖蛋白(heparan sulfate proteoglycan,

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本文编号：1280816