结核分枝杆菌ESAT-6的原核表达与纯化及免疫原性检测

发布时间：2017-12-14 08:17

  本文关键词：结核分枝杆菌ESAT-6的原核表达与纯化及免疫原性检测

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【摘要】：目的构建及鉴定含有GST标签的结核分枝杆菌esat-6基因的原核表达载体,并在大肠埃希菌中高效表达融合蛋白。方法 PCR扩增结核分枝杆菌esat-6基因,并构建到pGEX4T-1上,重组质粒经测序鉴定后进行诱导表达,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹分析重组蛋白。结果扩增出了结核分枝杆菌esat-6基因,构建了具有正确基因序列的质粒载体pGEX4T-1-ESAT-6,转化大肠埃希菌BL21后经诱导产生了高水平的表达产物,蛋白纯化后可被结核病患者血清特异性识别。结论构建了质粒载体pGEX4T-1-ESAT-6,并经诱导后高效表达了ESAT-6融合蛋白,为进一步研究结核菌的免疫机制奠定了基础。
【作者单位】： 河南省疾病预防控制中心结核病防治所;新密市疾病预防控制中心;
【基金】：国际合作项目“中澳卫生与艾滋病项目”基金资助项目(EID23) 河南省重点科技攻关基金资助项目(122102310053)
【分类号】：R378.91
【正文快照】： 结核病是由结核分枝杆菌引起的传染性疾病,它严重危害人类健康,是我国重点控制的传染疾病之一,也是全球关注的公共卫生问题和社会问题。世界卫生组织已将结核病作为重点控制的传染病之一。结核病作为严重危害人类健康的传染病每年有800多万新发结核病患者,有300万人死于结核病

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