UT-B基因敲除小鼠免疫功能的研究

发布时间：2017-12-15 07:07

  本文关键词：UT-B基因敲除小鼠免疫功能的研究

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【摘要】：本研究以尿素通道蛋白B(Urea Transporter B, UT-B)基因敲除小鼠(UT-B-/-)和UT-B野生型小鼠(WT)为实验对象,探讨UT-B基因对小鼠免疫功能的影响。采用基因鉴定法筛选UT-B基因敲除小鼠和UT-B野生型小鼠70只,分两组进行试验。第一组各取UT-B基因敲除小鼠和UT-B野生型小鼠15只,分别用于检测脾脏UT-B蛋白的表达、免疫器官指数的测定、小鼠脾脏淋巴细胞转化实验以及流式分析脾脏和外周血中淋巴细胞分群情况。第二组取UT-B基因敲除小鼠和UT-B野生型小鼠各20只进行荷瘤试验和肿瘤组织形态学观察。 蛋白免疫印迹(Western-blot)试验结果表明,UT-B基因敲除小鼠脾脏不表达UT-B蛋白,UT-B野生型小鼠脾脏表达分子量为41-54KD的UT-B蛋白。脾脏指数检测得出UT-B基因敲除小鼠脾脏指数为2.76,UT-B野生型小鼠脾脏指数为3.71,UT-B基因敲除小鼠脾脏指数显著低于UT-B野生型小鼠(P0.01)。脾脏淋巴细胞转化实验中刀豆蛋白A(ConA)刺激的UT-B基因敲除小鼠和UT-B野生型小鼠的脾脏淋巴细胞转化率分别为2.7和1.8(P＜0.01)；脂多糖(LPS)刺激的UT-B基因敲除小鼠和UT-B野生型小鼠的脾脏淋巴细胞转化率分别为3.62和3.22(P＜0.01)；UT-B基因敲除小鼠脾脏淋巴细胞转化率显著高于UT-B野生型小鼠(P＜0.01)。流式检测结果表明,UT-B基因敲除小鼠的CD4+T细胞,CD8+T细胞数量分别比野生型小鼠多15.18%(P＜0.01)和3.16%(P＞0.05),UT-B基因敲除小鼠B细胞数量低于WT小鼠(P＞0.05)。负荷前列腺肿瘤试验的抑瘤率为55.1%,UT-B基因敲除小鼠和UT-B野生型小鼠荷瘤后脾脏指数分别为4.7和4.3,两者相比差异不显著(P＞0.05)；UT-B基因敲除小鼠荷瘤后脾脏和外周血中CD4+T和T细胞数量分别比UT-B野生型小鼠高30.71%(P＜0.01)和37.45%(P＜0.01)。肿瘤组织石蜡切片HE染色形态学观察结果显示UT-B野生型荷瘤小鼠肿瘤组织石蜡切片中肿瘤细胞排列紧密,坏死较少、异型性明显、坏死区少量淋巴细胞浸润；UT-B基因敲除荷瘤小鼠肿瘤组织石蜡切片中肿瘤细胞排列紊乱,坏死较多,异型性不明显,癌细胞核固缩,坏死区有大量淋巴细胞浸润。 以上结果可以得出如下推断：UT-B基因的敲除增加了小鼠脾脏和外周血中发挥免疫功能的CD4+T细胞和T细胞的数量,增强了小鼠的细胞免疫功能,起到抑制肿瘤的作用；UT-B基因与机体淋巴组织对T淋巴细胞的选择性发育、分化以及肿瘤的发生和发展密切相关。
【学位授予单位】：广西大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R392

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