Claudin-7可诱导性条件性基因敲除小鼠模型的构建和鉴定

发布时间：2017-12-23 20:24

  本文关键词：Claudin-7可诱导性条件性基因敲除小鼠模型的构建和鉴定　出处：《世界华人消化杂志》2015年31期 　论文类型：期刊论文

  更多相关文章： 紧密连接蛋白 Claudin- 诱导性条件性基因敲除 Cre/Loxp 肿瘤

【摘要】：目的:应用Cre-Loxp系统构建Claudin-7蛋白在肠道可诱导性条件性基因敲除小鼠模型,并进行表型分析.方法:构建Claudin-7打靶载体,通过电击法转染入小鼠胚胎干细胞(ES细胞),用正负筛选法筛选阳性ES细胞并进行PCR鉴定和Southern鉴定,利用显微注射把发生正确同源重组的ES细胞注射进C57BL/6N小鼠囊胚,移入受体小鼠子宫以获得嵌合体小鼠.将得到的嵌合体小鼠与C57BL/6N小鼠交配获得Claudin-7-flox小鼠,该小鼠与PvillinCre ERT2转基因小鼠杂交,通过子代自交获得Claudin-7在肠道可诱导性条件性基因敲除(Cldn7fl/fl Villin-Cre ERT2)的小鼠,他莫昔芬(tamoxifen)药物诱导肠道Claudin-7基因敲除,对小鼠进行表型分析.结果:获得Claudin-7-flox小鼠及Claudin-7肠道可诱导性条件性基因敲除小鼠数只,Claudin-7肠道可诱导性条件性基因敲除小鼠出生时表型正常,发育良好,他莫昔芬(tamoxifen)药物应用后,诱导了小鼠肠道上皮细胞Claudin-7基因表达的缺失.小鼠出现脱水表现,活泼度降低,并出现死亡.结论:成功构建了Claudin-7肠道可诱导性条件性基因敲除小鼠模型,利用他莫昔芬诱导肠道Claudin-7基因敲除,初步构建了肠道炎症模型,为进一步研究Claudin-7在肠道肿瘤中的作用奠定了基础.
【作者单位】： 首都医科大学附属北京世纪坛医院肿瘤中心;
【基金】：国家自然科学基金面上资助项目,No.81372585 北京市教育委员会科技计划基金面上资助项目,No.KM201410025026 2014年北京市留学人员科技活动择优资助优秀类项目~~
【分类号】：R-332
【正文快照】： 核心提示:为研究Claudin-7基因在肠道肿瘤发生和发展中的分子生物学作用,本研究设计基于同源重组理论,利用ES细胞打靶以及显微注射技术,构建了Claudin-7基因在肠道中可诱导条件性敲除的小鼠模型,为体内研究Claudin-7的抑瘤功能奠定了坚实基础.李腾雁,王晓楠,李文晶,高宏,丁磊.

【参考文献】

相关期刊论文 前7条

1 曾文滔;张爱华;吕萌;刘燕;;ES细胞囊胚注射后脱透明带移植对小鼠产仔率和嵌合率的影响[J];安徽农业科学;2013年27期

2 吕有勇,路桂荣,李华,邓国仁,鄂征;抗新霉素基因为选择标记的共转染方法在细胞转化实验中的应用[J];北京医科大学学报;1986年01期

3 张丽娜;刘国安;杨红;;基因打靶技术的研究进展[J];生物技术通报;2010年09期

4 桑景荭;刘欣;;基因敲除小鼠在疾病研究中的应用[J];生物学通报;2009年12期

5 石玉衡;;基因敲除模型小鼠在疾病研究中的应用[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年33期

6 徐胤;房殿春;;claudin蛋白与消化系统肿瘤[J];现代消化及介入诊疗;2013年06期

7 方悦群,王春晖,王涛,何星,崔萱林,谢贵林,王秉瑞;白喉毒素基因序列染色体整合质粒的构建[J];中华微生物学和免疫学杂志;2001年03期

相关硕士学位论文 前1条

1 吴兴龙;ES小鼠的制备及SP-B mRNA的表达分析[D];河北农业大学;2011年

【共引文献】

相关期刊论文 前10条

1 李继连;王丽;胡满;;哺乳动物体细胞克隆技术应用的研究进展[J];中国畜牧兽医;2011年06期

2 邹习俊;杨红宇;陈周;罗红;廖晶;;实验动物应用研究概述[J];贵州畜牧兽医;2011年02期

3 何妍萍;贾怀杰;蔺国珍;王盈盈;白刚;胡永浩;景志忠;;猪伪狂犬病毒BarthaK61株TK缺失株的构建[J];甘肃农业大学学报;2013年06期

4 徐胤;王璞;沈才飞;李婧文;张安然;邵顺子;于晓娜;张昊翔;闫武;夏一菊;房殿春;;食管鳞癌及癌前病变组织中紧密连接蛋白claudin3和4的表达及临床病理意义[J];第三军医大学学报;2014年09期

5 段u&;矫健;张罗;;组胺对呼吸道上皮紧密连接表达的影响[J];中国耳鼻咽喉头颈外科;2015年08期

6 陈洁君;张维;宛煜嵩;金芜军;王友华;薛爱红;孙国庆;;全球转基因作物发展现状及趋势[J];农业生物技术学报;2011年02期

7 高章代;陈煜森;张晶晶;;血脑屏障与脑小血管病相关性研究进展[J];南通大学学报(医学版);2014年01期

8 张丽芳;石萍霞;李允利;郑云;贾乐;陈英准;;Claudin-1与Claudin-5在肺癌中的表达及意义[J];四川大学学报(医学版);2014年06期

9 葛良玉;李宏卫;祁兵;;大鼠颌下腺上皮间紧密连接蛋白表达特点[J];口腔生物医学;2014年04期

10 马永涛;张旭;赵蕴华;;基因打靶技术专利的计量分析[J];现代生物医学进展;2013年29期

相关博士学位论文 前8条

1 孙东云;化瘀涤痰通路中药调控肾上腺髓质素抑制肾小管上皮细胞表型转化的研究[D];河北医科大学;2013年

2 丁晓燕;乳腺癌预后异质性的相关研究[D];北京协和医学院;2013年

3 房渝;胃食管反流通过NFκB介导的炎症破坏小鼠食管粘膜屏障功能[D];中南大学;2013年

4 王立平;SB431542通过DNMT1调控CLDN6表达及其对乳腺癌细胞转移的作用机制[D];吉林大学;2014年

5 陈姿喧;血管平滑肌细胞DGCR8及卵巢癌细胞KLF4基因功能研究[D];南方医科大学;2014年

6 许瑞;气道酸性微环境对气道上皮紧密连接的影响及其分子机制[D];重庆医科大学;2014年

7 范沛;Drosha基因和mir-15b/16-2在血管平滑肌细胞中的功能和分子机制研究[D];南方医科大学;2013年

8 王小西;新生神经元异常融入齿状回神经环路介导卒中后癫痫发生[D];华中科技大学;2014年

相关硕士学位论文 前10条

1 范丽莉;哈茨木霉rac基因的敲除[D];哈尔滨工业大学;2011年

2 郭驰;BRD7基因在小鼠各组织中的表达及基因敲除小鼠模型的构建[D];中南大学;2012年

3 郑永胜;shRNA抑制FAK表达治疗甲状腺癌侵袭及转移的实验研究[D];福建医科大学;2012年

4 杨忠;利用brainbow小鼠研究C5神经根损伤后短固有束重建及Foxpl基因表达[D];天津医科大学;2013年

5 张超;利用brainbow研究神经根损伤后短固有束重塑及Foxpl基因的表达[D];天津医科大学;2013年

6 杨永兰;猪肌肉组织特异性诱导表达系统的构建和检测[D];华中农业大学;2013年

7 张莉林;294个稻瘟病菌转录因子基因的敲除和功能分析[D];浙江大学;2013年

8 刘畅;用于猪干细胞示踪的Oct4-eGFP报告系统建立[D];中国农业科学院;2013年

9 王贺伟;可删除标记基因表达载体的构建[D];石河子大学;2013年

10 李红飞;BC022687基因原核及真核重组质粒的构建及表达[D];武汉科技大学;2013年

【二级参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 余露露;刘帅;章嘎;佟春玲;关伟军;马月辉;卿素珠;;动物转基因技术的发展及应用[J];安徽农业科学;2009年05期

2 郭阳;易咏红;孙卫文;;钙结合蛋白Calbindin在FMR1基因敲除小鼠脑组织中的表达[J];中华神经医学杂志;2006年03期

3 程军;李金平;田卓;胡厚源;;肝X受体激动剂对ApoE基因敲除小鼠主动脉壁C-反应蛋白和CD40配体表达及平滑肌细胞含量的影响[J];第三军医大学学报;2009年13期

4 刘宏;柳青;雷寒;李秀兰;陈显;;炎症促进清道夫受体基因敲除小鼠主动脉脂质积聚的分子机制[J];第三军医大学学报;2010年16期

5 刘英;张瑞君;伍志伟;施苓;;转基因疾病动物模型的研究进展[J];动物医学进展;2006年12期

6 欧翔;代小艳;唐雅玲;曹冬黎;郝新瑞;胡炎伟;李晓旭;肖继;刘协红;唐朝克;;T0901317对apoE基因敲除小鼠肝脂质蓄积及肝固醇调节元件结合蛋白-1c表达的影响[J];解剖学研究;2008年03期

7 周丽斌;基因敲除技术在2型糖尿病研究中的应用[J];国外医学.内分泌学分册;2002年03期

8 万海英;汤华;;基因敲除技术现状及应用[J];医学分子生物学杂志;2007年01期

9 韦朝霞;易咏红;孙卫文;苏涛;邓维意;廖卫平;;突触素在FMR1基因敲除小鼠脑组织中的表达[J];广州医学院学报;2008年01期

10 马贯中;吕萌;;FKBP38条件性基因敲除胚胎干细胞株的建立[J];安徽农业科学;2012年36期

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 肖奎;王桂芳;董春玲;陈智鸿;胡成平;白春学;;水通道蛋白1基因敲除小鼠的饲养繁殖与基因型鉴定[J];湘南学院学报(医学版);2007年01期

2 陈通克;陈锡文;管敏强;赵慧玲;王丽花;林孝坤;李安乐;;PAX-8基因敲除小鼠的饲养繁殖及基因型鉴定[J];实验动物科学;2009年02期

3 刘忠华,张开镐;基因敲除小鼠在药物依赖性研究中的应用[J];中国药物依赖性杂志;2001年02期

4 杜智勇,粟永萍;SRC-3基因敲除小鼠的饲养繁殖及鉴定[J];第三军医大学学报;2005年05期

5 景志杰;郭民;;载脂蛋白E基因敲除小鼠血脂及病理组织学观察[J];临床医学工程;2011年06期

6 杜静;叶亮;林欣乾;吴志成;夏勇;杨超;;白细胞介素-10基因敲除小鼠血液生理生化指标分析[J];广东医学;2013年14期

7 武磊;赵博;张志清;杲修杰;冷雪;刘晓华;;UCH-L1基因敲除小鼠的饲养、繁殖及鉴定[J];解放军预防医学杂志;2013年05期

8 朱加银;陈锡文;赵惠玲;姚苏琴;;腺苷A2a受体基因敲除小鼠不同繁育方法比较[J];实验动物与比较医学;2008年03期

9 赵立玲;王敏;袁凌青;谢辉;李辉;罗湘杭;廖二元;;脂联素基因敲除小鼠血管钙化的研究[J];实用预防医学;2009年05期

10 桑景荭;刘欣;;基因敲除小鼠在疾病研究中的应用[J];生物学通报;2009年12期

相关会议论文 前10条

1 张文高;郑广娟;张静;王显刚;刘龙涛;吴敏;张亚同;马学盛;孟宪忠;;脂欣康胶囊对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化及斑块稳定性干预作用研究[A];第七次全国中西医结合心血管病学术会议论文汇编[C];2005年

2 张文高;郑广娟;王显刚;刘龙涛;吴敏;张亚同;马学盛;;载脂蛋白E基因敲除小鼠及其在心血管病中西医结合研究中的应用[A];全国中西医结合治疗心血管病及血瘀证高级论坛和研修班论文汇编[C];2004年

3 张文高;郑广娟;孟宪忠;朱庆军;张丹;王显刚;杨勇;刘龙涛;吴敏;张亚同;马学盛;;脂欣康等三种调脂中药对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化及斑块稳定性干预作用研究[A];第四次全国中西医结合养生学与康复医学学术研讨会论文集[C];2004年

4 张文高;杨秀丽;;载脂蛋白E基因敲除小鼠在老年神经功能障碍疾病中西医结合研究中的应用[A];第六次全国中西医结合养生学与康复医学学术研讨会论文集[C];2009年

5 张文高;郑广娟;朱庆军;张丹;张静;王显刚;杨勇;刘龙涛;吴敏;张亚同;马学盛;孟宪忠;;脉心康与血脂康对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化及易损斑块干预作用与机理研究[A];第七次全国中西医结合心血管病学术会议论文汇编[C];2005年

6 张文高;郑广娟;朱庆均;宋洁;杨秀丽;张丹;张静;刘龙涛;王显刚;;载脂蛋白E基因敲除小鼠及其在老年病中西医结合研究中的应用[A];第八次全国中西医结合虚证与老年医学学术研讨会论文集[C];2005年

7 刘树强;罗昊澍;刘佳利;崔胜;;Sp1可通过与GC框结合直接调控Lhx4基因的表达[A];全国动物生理生化第十次学术交流会论文摘要汇编[C];2008年

8 张文高;;载脂蛋白E基因敲除小鼠在心血管病与老年病中西医结合研究中的应用[A];中国医师协会中西医结合医师分会成立大会暨第一届年会会议资料[C];2007年

9 左宝芬;杜小燕;陈振文;;近交系基因敲除小鼠微卫星不稳定性分析[A];第十届中国实验动物科学年会论文集[C];2012年

10 刘学;李霄鹤;郑小红;宁文;;Fstl1基因敲除小鼠的表型分析[A];细胞—生命的基础——中国细胞生物学学会2013年全国学术大会·武汉论文摘要集[C];2013年

相关重要报纸文章 前2条

1 夏洪平;利用RNAi对肥胖和糖尿病进行治疗[N];健康报;2005年

2 香港麦迪信医学出版公司 提供;抗哮喘基因位点找到[N];医药经济报;2002年

相关博士学位论文 前10条

1 张学新;尿素通道蛋白B基因敲除小鼠心脏电生理特性的改变及其机制研究[D];吉林大学;2007年

2 孟博;REGγ基因敲除小鼠类精神分裂症行为学及分子机制初探[D];华东师范大学;2010年

3 只向成;CD36基因敲除小鼠的皮肤伤口愈合[D];天津医科大学;2003年

4 徐康;OPG基因敲除小鼠骨、糖和脂的代谢变化[D];中南大学;2008年

5 赵立玲;脂联素基因敲除小鼠血管钙化及其钙化机制的研究[D];中南大学;2009年

6 崔勇志;小鼠Stat3/5基因座的克隆及Stat5a/b条件性基因敲除小鼠的制备[D];中国医科大学;2002年

7 杜艳伟;代谢重构在UT-B基因敲除小鼠心肌肥大发病机制中的作用[D];吉林大学;2015年

8 孙东云;化瘀涤痰通路中药调控肾上腺髓质素抑制肾小管上皮细胞表型转化的研究[D];河北医科大学;2013年

9 翁土军;利用成骨细胞特异性基因敲除小鼠模型研究Pten和Gab1在骨稳态过程中的功能[D];中国人民解放军军事医学科学院;2009年

10 耿燕;Fstll对于出生时肺的成熟起至关重要的作用[D];南京大学;2011年

相关硕士学位论文 前10条

1 张亚平;1α羟化酶基因敲除小鼠和维生素D3受体基因敲除小鼠生物学特性的研究[D];苏州大学;2006年

2 ACHIM CCHITVSANZWHOH SATHEKA;[D];东北师范大学;2014年

3 滕丽萍;FMR-1基因敲除小鼠的焦虑及探索行为分析[D];浙江大学;2010年

4 程文君;FAAP基因敲除小鼠模型的构建和表型初步分析[D];山东师范大学;2015年

5 李珊珊;Wnt5a基因敲除小鼠腭裂发生的机制研究[D];大连医科大学;2008年

6 杨李果;NR1基因敲除小鼠前额叶脑区突触可塑性及学习记忆的研究[D];华东师范大学;2011年

7 张毅敏;Perilipin 1基因敲除小鼠脂肪组织纤维化研究[D];郑州大学;2013年

8 翟占强;载脂蛋白M基因敲除小鼠模型的构建和鉴定[D];苏州大学;2014年

9 俞慧清;Lats1基因敲除小鼠生物学特性的研究及种质保存[D];扬州大学;2001年

10 朱娟娟;UT-B基因敲除小鼠免疫功能的研究[D];广西大学;2013年

，

本文编号：1325360