幽门螺杆菌感染模型的建立及其外膜蛋白HopX对胃粘膜细胞生长的影响

发布时间：2017-12-27 09:46

  本文关键词：幽门螺杆菌感染模型的建立及其外膜蛋白HopX对胃粘膜细胞生长的影响　出处：《江苏大学》2010年硕士论文　论文类型：学位论文

  更多相关文章： 幽门螺杆菌 心理应激 茶水 幽门螺杆菌外膜蛋白

【摘要】： 目的:建立幽门螺杆菌感染模型,并探讨外界因素对幽门螺杆菌感染模型建立的影响;研究幽门螺杆菌外膜蛋白HopX对胃粘膜细胞生长的影响,为深入研究幽门螺杆菌的致病机制奠定基础。 方法: 1、常规培养幽门螺杆菌标准菌株NCTC11637,采用革兰染色、快速尿素酶试验和氧化酶试验进行鉴定; 2、幽门螺杆菌感染模型建立:40只雄性BALB/C小鼠适应性饲养1周后随机分成两组,即Hp组和对照组。Hp组Hp菌液灌胃,0.4ml/只(约含Hp为10~9个/ml),所有动物灌胃前禁食12小时、禁水4小时,隔日一次,连续5次,10天完成;灌胃结束后再饲养4周后处死,分离胃组织,将其沿胃大弯纵向剪开,用无菌生理盐水洗净胃内残留物,纵向一分为二,一半用于快速尿素酶试验,另一半10%甲醛固定,石蜡包埋,5μm切片、苯胺蓝染色进行Hp定植评价。 3、外界因素对幽门螺杆菌感染模型建立的影响:40只BALB/C小鼠适应性饲养1周后随机分为双重因素组、单纯Hp组、单纯心理组、对照组,通过Hp菌液灌胃和电击造模,电击结束后处死动物,行Hp感染鉴定,同时观察胃粘膜损伤情况。40只雄性BALB/C小鼠适应性饲养1周后随机分成两组,即茶水组、纯净水组;茶水给予3%茶水,一直持续到实验结束;纯净水组则给予普通饮用纯净水。两组小鼠都Hp菌液灌胃,灌胃结束后再饲养4周后处死,行Hp感染鉴定。 4、用含10%小牛血清的RPMI1640培养液常规培养胃癌细胞SGC7901,加入不同浓度HopX蛋白,应用细胞计数、细胞活力、MTT、Hoechest33258荧光染色等方法分析HopX对细胞增殖的影响;收集培养上清,ELISA法检测IL-8的分泌量;提取细胞总RNA,用荧光定量RT-PCR法检测IL-8mRNA表达水平。 结果: 1.成功建立了幽门螺杆菌感染模型,明确了心理应激和茶水对幽门螺杆菌感染模型建立的影响; 2.HopX可诱导胃癌细胞SGC7901表达和分泌IL-8,该效应呈浓度依赖性;HopX可抑制SGC7901细胞的增殖及活力,呈剂量-时间依赖关系。 结论:成功建立了幽门螺杆菌感染模型;明确了心理应激和茶水对幽门螺杆菌感染模型的建立有一定影响;HopX对胃癌细胞生长、IL-8分泌与表达有一定的抑制作用,其抑制作用与浓度和作用时间有一定关系。
[Abstract]:Objective: to establish a Helicobacter pylori infection model and explore the influence of external factors on the establishment of Helicobacter pylori infection model, and to study the effect of Helicobacter pylori outer membrane protein HopX on the growth of gastric mucosal cells, so as to lay a foundation for further study of the pathogenesis of Helicobacter pylori.
【学位授予单位】：江苏大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R-332

【参考文献】

相关期刊论文 前7条

1 秦敏,杨宗新,雒小玲,涂小平,周富昌,吴皓;幽门螺杆菌动物感染模型的建立及较适感染剂量的确定[J];微生物学免疫学进展;2002年01期

2 孙桂华,宋鸿,黄小让,詹纯列,周龙书,徐本法,周民伟,徐德兴,李秋生,赖日权,王卓才;中国1号小型猪建立幽门螺杆菌相关性胃炎模型[J];新消化病学杂志;1997年12期

3 卢莉;王英;王祝欣;;心理社会因素对消化性溃疡的影响[J];中国社会医学;1995年04期

4 李铁,于吉人,冈部进;幽门螺杆菌感染对延缓乙酸诱导大鼠胃溃疡愈合的实验研究[J];中国应用生理学杂志;1998年02期

5 潘国宗;世纪之交的中国消化病学[J];中华消化杂志;2000年03期

6 李增烈,廖宁逊;幽门螺杆菌易感的若干社会经济因素[J];中华内科杂志;1998年08期

7 张亚历,周殿元,温敏,山田宣孝;胃粘膜炎症与Hp感染的相关性研究[J];中华消化内镜杂志;1999年01期

，

本文编号：1341195