结核分枝杆菌dnaE2基因的转录调控研究

发布时间：2017-12-27 23:29

  本文关键词：结核分枝杆菌dnaE2基因的转录调控研究　出处：《华中农业大学》2010年硕士论文　论文类型：学位论文

  更多相关文章： 结核分枝杆菌 DnaE2 转录因子 NmtR

【摘要】：结核分枝杆菌(M. tuberculosis)的耐药问题是当前控制结核病爆发和流行的关键问题。已有的研究表明,结核分枝杆菌的一个C家族的DNA聚合酶DnaE2是其基因组发生高频突变以及抗药性产生所必须的。因此,研究DnaE2的表达调控对于深入理解结核耐药性产生的分子基础具有重要意义。本研究筛选和鉴定了一个ArsR-SmtB家族的转录因子NmtR (Rv3744)能够直接参与DnaE2基因的转录调控并且显著影响分枝杆菌的耐药突变能力,具体取得了以下几个方面的结果： 本研究取得了以下发现： 1)通过单杂交验证以及EMSA实验发现了多个重要转录因子,包括新型阻遏蛋白NmtR、双组份RR蛋白RegX3、σ因子SigB以及SOS系统的阻遏蛋白LexA与dnaE2启动子区域的物理相互作用； 2)首次发现新型转录因子NmtR对dnaE2的转录调控作用,并在M. smegmatismc2155体内通过Ch-IP染色质免疫沉淀实验,获得了NmtR可能的DNA调控序列； 3)通过基因敲除,构建了nmtR缺失突变株MsmΔnmtR,敲除菌株MsmΔnmtR的dnaE2基因的表达量是野生型M. smegmatis mc2155的1.7倍； 4)针对nmtR缺失突变株MsmΔnmtR进行了抗药性研究。缺失突变株在受到紫外线胁迫条件下基因突变频率比野生型M. smegmatis mc2155增加了2倍。 这些工作为阐明这个独特的结核杆菌的易错DNA聚合酶MtbDnaE2的表达调控规律,其抗药突变机制,以及Mtb持续性感染能力等提供了重要信息。
[Abstract]:The drug resistance of Mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis) is the key problem to control the outbreak and epidemic of tuberculosis. Previous studies have shown that the DNA polymerase DnaE2 of a C family of Mycobacterium tuberculosis is essential for high frequency mutations in the genome and resistance to drug resistance. Therefore, the study of the expression and regulation of DnaE2 is of great significance in understanding the molecular basis of drug resistance. This study screened and identified a transcription factor NmtR (Rv3744) of ArsR-SmtB family, which can directly participate in the transcriptional regulation of DnaE2 gene and significantly affect the mutagenesis ability of Mycobacterium.
【学位授予单位】：华中农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R378

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本文编号：1343660