前列腺素D2对心房钠尿肽分泌的影响及其机制研究

发布时间：2017-12-28 10:02

本文关键词：前列腺素D2对心房钠尿肽分泌的影响及其机制研究　出处：《延边大学》2014年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：钠尿肽家族(family of natriuretic peptides, NPs)是一类具有相似结构及生物学活性的激素,其对机体的稳态发挥重要作用,如排钠利尿、调节机体水盐平衡,通过与其它旁分泌激素的相互作用调节血压,还参与调控细胞增殖和细胞分泌等细胞生理变化。迄今,在哺乳动物体内共发现三种NPs物质：心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide, ANP),脑钠尿肽(brain natriuretic peptide, BNP)和C型钠尿肽(C-type natriuretic peptide, CNP)。人们在绿曼巴(Dendroaspis angusticeps)的毒液内发现了第四种NP,D型钠尿肽(Dendroaspis-type natriuretic peptide,DNP),且与人类血浆有免疫反应。 ANP是由心肌细胞合成和分泌的一种对心脏的功能起重要作用的激素,它广泛分布于心脏血管系统、中枢神经系统、免疫系统及肾脏组织中,与膜结合钠尿肽受体A或C (natriuretic peptide receptor A/C, NPRA, NPRC)结合而发挥生物学作用。ANP与NPRA受体结合,激活与其耦联的鸟苷酸环化酶,致使细胞内第二信使环磷酸鸟苷(guanosin3',5'-cyclic monophosphate, cGMP)的生成,继而激发细胞内多个信号的转导,调节细胞生理功能。NPRC是一种未与鸟苷酸环化酶耦联的受体,其主要功能是介导清除体内三种NPs。也有研究证明,NPR-C也能通过百日咳毒素敏感型G蛋白传导胞外信号。调节ANP合成和分泌的因素有多种,概括如体液、物理及神经等。心房肌细胞的物理牵张是诱发ANP分泌的关键因素。激素类物质也参与调节ANP的分泌,如内皮素(endotheline-1,ET-1)、血管紧张素、血管升压素等。其中ET-1对牵张诱发ANP分泌的过程是一个不可或缺的因素。然而心房牵张、缺血以及ET-1最终都通过影响花生四烯酸代谢生成前列腺素来调节ANP分泌的。前列腺素(prostaglandins, PGs)是一类不饱和脂肪酸激素类,分布于人体及动物体的多种组织,对机体多种系统起重要的调节作用,尤其是对心血管活动的调节。哺乳动物的心肌细胞能合成PGs,如PGF2α、PGE2、PGI2和PGD2。研究报道,PGs对心血管疾病调节至关重要,其参与心肌肥大、心肌梗死及心肌纤维化的发病过程。起初PGD2被认为是一种生物活性较低的前列腺素,后有研究证明,PGD2对心血管的调节作用也是至关重要的,其对缺血再灌注损伤有拮抗作用。早期研究表明,调节ANP的分泌过程涉及到多种PGs。但对于PGD2如何参与调节心房ANP分泌的机制缺乏实验及理论支持。本项研究以离体搏动的大鼠心房为灌流模型,探讨PGD2对大鼠心房ANP分泌的影响及其机制,为阐明PGD2对心脏作用提供初步依据。本实验结果如下： 1.与对照循环相比,PGD2(1.0μmol/L)明显增加ANP的分泌(P0.001),且称时间依赖性,同时也促进心房搏动压的上升(P0.01)。 2.L-型Ca2+通道的阻断剂nifedipine (1.0μmol/L)减弱了PGD2对心房ANP分泌的增加效应(与PGD2循环比,P0.001,与nifedipine循环比,P0.05),但没有改变PGD2促进心房搏动压上升的作用(与nifedipine循环比,P0.05)。 3.PKA阻断剂H-89(1.0μmol/L)减弱了PGD2对心房ANP分泌的增加效应(与PGD2循环比,P0.001,与H89循环比,P0.05),但没有改变PGD2促进心房搏动压上升的效应(与H89循环比,P0.05)。 4.蛋白激酶非选择性抑制剂staurosporine (0.3μmol/L)减弱了PGD2对心房ANP分泌的增加效应(与PGD2循环比,P0.001,与staurosporine循环比,P0.05),同时也抑制了PGD2促进心房搏动压上升的效应(与staurosporine循环比,P0.05)。 5.MAPK/ERK的阻断剂PD98059(30.0μmol/L)减弱了PGD2对心房ANP分泌的增加效应(与PGD2循环比,P0.05,与PD98059循环比,P0.05),同时也抑制了PGD2促进心房搏动压上升的效应(与PD98059循环比,P0.05)。 6.联合处理PD98059和H-89,完全抑制了PGD2对心房ANP分泌的增加效应(与PD98059+PGD2循环比,P0.01,与PD98059+H89循环比,P0.05),同时也抑制了PGD2促进心房搏动压上升的效应(与PD98059+H89循环比,P0.05)。 7. Western blotting结果表明,PGD2增加心房ERK1/2的磷酸化(与对照组相比,P0.05)。共同处理PD98059和PGD2后,与PGD2组相比,心房ERK1/2的磷酸化降低(P0.05)。共同处理PD98059、H-89和PGD2后,与PGD2组相比,心房ERKl/2的磷酸化降低(P0.05),与PD98059和PGD2组比没有变化(P0.05)。 8.联合处理nifedipine和PD98059可完全抑制PGD2增加心房ANP分泌的效应((与PD98059+PGD2循环比,P0.01,与PD98059+nifedipine循环比,P0.05),同时也抑制PGD2增高心房搏动压的效应(与PD98059+nifedipine循环比,P0.05)。 9.PTK的抑制剂genistein (30.0μmol/L)可阻断PGD2增加ERK1/2磷酸化的作用(与PGD2组比较,P0.05),并减弱了PGD2对心房ANP分泌的增加效应(与PGD2循环相比,P0.001,与genistein循环比,P0.05),同时抑制了PGD2对心房搏动压的增加(与genistein循环比,P0.05)。 10. Genistein+PD98059不仅可完全阻断PGD2促进心房ANP分泌的作用(与PGD2比较,P0.01；与genistein+PD98059循环比较P0.05),而且也可阻断PGD2增加心房搏动压的效应(与genistein+PD98059循环比较,P0.05)。以上结果提示： 1.PGD2显著增加离体搏动大鼠心房ANP的分泌。 2.PGD2通过PKA-ERK信号转导途径调控心房ANP的分泌,其中PTK也可发挥重要的调节作用。
[Abstract]:The natriuretic peptide family (family of, natriuretic peptides, NPs) is a kind of hormone with similar structure and biological activity, the homeostasis of human body play an important role, such as the regulation of body water and salt balance, natriuresis, and other hormones through paracrine interactions regulate blood pressure, is also involved in the regulation of cell proliferation and secretion cellular physiological changes. So far, three kinds of NPs substances have been found in mammals: atrial natriuretic peptide (ANP), brain natriuretic peptide (BNP) and C type natriuretic peptide (C-type, BNP). People in the Green Mamba (Dendroaspis angusticeps) found that fourth kinds of NP venom, D type natriuretic peptide (Dendroaspis-type natriuretic, peptide, DNP), and the immune response and human plasma.
【学位授予单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R331

【参考文献】