5-羟色胺在大鼠海马CA1、CA2和CA3的表达

发布时间：2017-12-28 21:31

本文关键词：5-羟色胺在大鼠海马CA1、CA2和CA3的表达　出处：《大连医科大学》2010年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】： 目的：大鼠海马属于脑的边缘系统,包括CA1、CA2和CA3。在结构上无明显分界标志,功能上可视为一个整体。5-羟色胺(5-HT),一种在中枢神经系统广泛分布的神经递质,主要参与情感、睡眠、疼痛、学习记忆等复杂生理功能的调节。为了解5-羟色胺在海马中的分布特点,本实验采用5-HT特异性抗体的方法,利用免疫组织化学技术,观察海马CA1、CA2和CA3中三个区域5-HT神经元及神经纤维终末的表达,为进一步研究5-HT在海马学习、记忆的作用机制,提供形态学依据。方法：1、实验动物和主要试剂：成年雄性SD大鼠8只(由大连医科大学实验动物中心提供)、山羊超敏二步法免疫组化检测试剂、浓缩型DAB(购自北京中杉金桥)。2、灌注固定：把大鼠经10%水合氯醛进行腹腔麻醉。仰卧固定,用剪刀打开胸腔,将穿刺针经左心室插入升主动脉,剪开右心耳,先用150ml生理盐水快速冲洗后,给予4%多聚甲醛磷酸缓冲液300ml灌注,持续灌注4小时后断头开颅取脑,放入相同固定液中4℃过夜。在振动切片机连续冠状切片,片厚30um,选取具有海马的切片,置入0.01mol/L的PBS(PH值7.4)溶液中备用。3、免疫组织化学法：采用二步法进行免疫组织化学染色。4、统计学分析：在正置荧光显微镜图像分析仪观察拍摄,核团定位参照George Raxinos,Charles Watsonbian编著的The Rat Brain in stereotaxic coordinates(大鼠脑立体定位图谱,第三版)。在低倍镜下观察海马和5-HT阳性神经元在海马中CA1、CA2和CA3区的表达。在高倍镜下观察5-HT阳性神经纤维终末。所得数据采用SPSS16.5软件分析。结果：在低倍光镜下观察：1、大鼠海马内5-HT免疫反应产物为棕黄色(图1 a),可见大量的5-HT能阳性神经元和树突。阳性产物位于胞浆中,细胞核透明,未见明显染色(图2a,3a,4a)2、免疫反应阳性产物在海马锥体层细胞中分布最多,密集呈带。3、在20×10倍光镜下计数,CA2区免疫反应阳性神经元数最多,其次是CA1区,CA3区最少。4、CA3的细胞比其它区域略小,染色比CA1区弱。在高倍镜下：1、在海马CA1、CA2和CA3中呈阳性反应的神经元胞体为圆形或卵圆形。2、海马内可见免疫反应阳性、呈串珠状的5-HT能神经纤维终末(图2b,3b,4b)。免疫反应对照切片为阴性(4×10),未见CA1、CA2和CA3区有5.HT免疫反应阳性神经元及神经纤维终末表达。统计学结果：CA1、CA2和CA3区阳性神经元平均数士标准差分别是5.60±1.075,5.70±1.252,3.50±1.269。经统计学分析CA1、CA2与CA3区阳性神经元数之间比较有统计学差异,CA1CA3, CA2CA3 (P0.01)。结论：1、大鼠海马内有5-HT能神经元和神经纤维终末表达。2、5-HT免疫阳性产物在CA1、CA2与CA3区表达强度有差异,其阳性神经元数CA1CA3, CA2CA3。
[Abstract]:Objective: the rat hippocampus belongs to the brain's marginal system, including CA1, CA2 and CA3. There is no clear demarcation mark on the structure, and the function can be regarded as a whole. 5- serotonin (5-HT), a neurotransmitter widely distributed in the central nervous system, is mainly involved in the regulation of complex physiological functions such as emotion, sleep, pain, learning and memory. In order to understand the distribution characteristics of 5- of 5-HT in the hippocampus, this experiment adopts the method of 5-HT specific antibodies, using immunohistochemistry to observe the expression of three 5-HT neurons and nerve fiber terminals CA2 and CA3 and CA1 in hippocampus, mechanism of memory for further study of 5-HT in the hippocampus of learning, and provide morphological basis.
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R329

【参考文献】