戊型肝炎病毒高通量中和效价评价模型的建立

发布时间：2018-01-06 19:25

  本文关键词：戊型肝炎病毒高通量中和效价评价模型的建立　出处：《病毒学报》2015年01期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：广泛有效的体外感染模型的缺乏限制了抗戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)抗体及血清定量化中和效价的评估,从而阻碍了对HEV相关抗体应答及免疫机制的深入研究。本研究首先通过在HEV低效复制细胞系HepG2肝癌细胞株上进行了HEV感染细胞后的连续监测,直到第13d到达病毒载量的检测下限,验证了该细胞系建立感染模型的可行性,进一步采用96孔多通道平行感染、核酸提取及实时荧光定量PCR对五株抗HEV的鼠源单克隆抗体及四位戊肝疫苗接种者的接种前、后血清样本进行了细胞中和试验。结果显示应用该模型能够实现对不同中和能力的单抗及接种疫苗前后的血清进行中和效价的定量化评估。表明本研究已成功建立了HEV体外高通量中和评价模型,同时也显示出该模型在HEV疫苗及抗体应答表位研究中所具有的潜在价值。
[Abstract]:The infection model is widely effective in vitro limits of hepatitis E virus (Hepatitis E virus, HEV) antibody and quantitative evaluation of serum neutralization titer, which hinders the further research of HEV antibody response and the immune mechanism. This study first through the HEV complex system inefficient HepG2 cells of hepatocellular carcinoma cell lines continuous monitoring of cells after HEV infection, the detection limit until the 13D reaches the viral load, verify the feasibility of the establishment of the cell line infection model, further by using the 96 hole multi channel parallel infection, vaccination of nucleic acid extraction and real-time fluorescence quantitative PCR in five strains of anti HEV murine monoclonal antibody and four hepatitis E vaccine recipients before the cell neutralization test after serum samples. The results showed that the application of the model can be achieved on different sera before and after neutralizing monoclonal antibody and vaccine for the neutralization titer Quantitative assessment. Evidence of this research have been successfully established in vitro HEV high flux and evaluation model, and show that the model in the HEV vaccine and antibody response has the potential value of the table in the study.

【作者单位】： 厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室 国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心 公共卫生学院;厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室 国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心 生命科学院;
【基金】：国家基金(81373061) 重大新药创制(2013ZX09101017) 厦门市科技计划项目(3502Z20131001)
【分类号】：R373.21
【正文快照】： 戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)引发戊型肝炎(Hepatitis E),是全球范围内引发急性病毒性肝炎的最主要病原体之一。尤其在一些发展中国家50%的急性病毒性肝炎病例与HEV相关[1],HEV已经成为威胁人群健康的公共卫生问题。患戊型肝炎的人群病死率达到0.2%~4%,孕妇中病死率可

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本文编号：1389209