人足月胎盘间充质干细胞体外分离纯化及生物学性状的研究

发布时间：2018-01-09 09:41

  本文关键词：人足月胎盘间充质干细胞体外分离纯化及生物学性状的研究　出处：《青岛大学》2010年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】： 目的：拟从人足月胎盘分离纯化出间充质干细胞(Mecenchymal stem cells MSCs),进行体外扩增,研究其生物学性状,并向成脂细胞分化,寻找新的间充质干细胞来源。方法：1、采取4种不同的消化分离方法从人足月胎盘中分离纯化MSCs,胎盘组织剪碎后平均分为4组：A、胰蛋白酶+淋巴细胞分离液组；B、胰蛋白酶／胶原酶Ⅳ(1：1)+羟乙基淀粉沉淀组；C、胶原酶Ⅳ+淋巴细胞分层液分离组；D、胶原酶Ⅳ+羟乙基淀粉沉淀组,五份标本／组。2、第3代细胞经CD44抗体、CD34抗体、CD29抗体、CD106抗体免疫荧光方法鉴定；通过细胞生长曲线及电镜观察其生物学性状。3、第三代细胞采用含异丁基-甲基黄嘌呤、地塞米松、胰岛素的高糖DMEM诱导液向脂肪细胞诱导,油红O染色,观察MSCs的形态变化,未诱导组作为平行对照。结果：1、在其他条件相同的情况下,胶原酶Ⅳ+羟乙基淀粉沉淀组培养成功率为100%,其余3组分别为20%,60%,80%,胶原酶Ⅳ+羟乙基淀粉沉淀组细胞出现伸展时间及原代培养时间均短于其他三组。2、人胎盘间充质干细胞为贴壁生长的长梭形成纤维样细胞,增殖能力较强；强表达透明质酸受体CD44和整合素家族受体CD29,不表达造血干细胞标志CD34和内皮细胞标志CD106；3、胎盘MSCs具有向脂肪细胞分化的潜能,油红O染色结果阳性。结论：使用胶原酶Ⅳ消化胎盘组织,结合羟乙基淀粉沉淀法能较好地分离人胎盘间充质干细胞；从人足月胎盘中成功分离出间充质干细胞,与其他来源的间充质干细胞生物学性状相似,可组为组织工程新的干细胞来源。
[Abstract]:Objective: to isolate and purify mesenchymal stem cells from human full-term placenta and to study its biological characteristics. MSCs was isolated from human full-term placenta by four different digestion methods. The placenta tissue was divided into 4 groups after shearing and divided into 4 groups: the trypsin lymphocyte isolate group and the trypsin lymphocyte isolate group. B, trypsin / collagenase 鈪，

本文编号：1400920