人呼吸道合胞病毒M蛋白非复制型重组腺病毒的构建和鉴定

发布时间：2018-01-19 15:33

  本文关键词： 人呼吸道合胞病毒 M蛋白 非复制型重组腺病毒　出处：《中国生物工程杂志》2008年05期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,RSV)基质蛋白(matrix protein,M)在RSV形态发生上具有重要作用,因含有CTL及CD4+T细胞抗原表位,在疫苗研究上具有一定意义。为此,应用RT-PCR方法从感染RSV的HEp-2细胞中扩增获得M蛋白基因,构建了含M基因的非复制型重组腺病毒并进行表达和鉴定。基因序列分析显示RSV M基因仅有一处碱基发生错义突变。获得的非复制型重组腺病毒FGAd/RSVM感染293细胞,观察到细胞出现CPE,RT-PCR发现M基因有转录,Western blotting及间接免疫荧光分析检测到M蛋白。成功克隆A亚型RSV Long株M基因,并获得一株可表达A亚型RSV M蛋白的非复制型重组腺病毒FGAd/RSVM,可用于体内研究观察其免疫效果及免疫保护作用。
[Abstract]:Human respiratory syncytial virus (RSVV) matrix protein. M) plays an important role in RSV morphogenesis, because of the presence of CTL and CD4 T cell epitopes, it has a certain significance in vaccine research. M protein gene was amplified by RT-PCR from HEp-2 cells infected with RSV. A non-replicating recombinant adenovirus containing M gene was constructed and expressed and identified. Gene sequence analysis showed that RSV. There was only one missense mutation in the M gene. The obtained non-replicating recombinant adenovirus FGAd/RSVM was infected with 293 cells. The expression of M gene was detected by RT-PCR. M protein was detected by Western blotting and indirect immunofluorescence analysis. M gene of RSV Long strain A was cloned successfully. A non-replicating recombinant adenovirus FGAd-RSVM expressing subtype A RSVM protein was obtained, which can be used to study its immune effect and protective effect in vivo.
【作者单位】： 安徽医科大学免疫学教研室 安徽医科大学免疫学教研室 安徽医科大学免疫学教研室 安徽医科大学免疫学教研室 安徽医科大学免疫学教研室 安徽医科大学免疫学教研室 安徽医科大学免疫学教研室 安徽医科大学免疫学教研室
【基金】：教育部留学回国人员科研启动基金资助项目(20071108)
【分类号】：Q789
【正文快照】： 人类呼吸道合胞病毒(human resp iratorysyncytialvirus,RSV)广泛分布于世界各地,是引起婴幼儿呼吸道感染最主要的病毒性病原,老年人和免疫抑制个体也是RSV易感人群[1]。除了引起上呼吸道感染外,还是引起毛细支气管肺炎等下呼吸道感染的重要原因。一般首次感染多发生在一岁以

【共引文献】

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本文编号：1444799