大豆主要过敏原Gly m Bd 28K基因的克隆表达、纯化及多抗血清的制备

发布时间：2018-03-09 06:12

  本文选题：大豆　切入点：过敏原　出处：《河南工业大学学报(自然科学版)》2015年04期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：RT-PCR克隆大豆主要过敏原Gly m Bd 28K基因,根据序列设计引物,扩增目的基因的开放阅读框,与MBP载体连接,测序鉴定,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,并用IPTG诱导表达.亲和层析法纯化重组蛋白,SDS-PAGE验证蛋白的纯度,免疫新西兰大白兔,收集多抗血清,用ELISA法测效价.扩增出含Gly m Bd 28K目的基因片段,诱导并获得高浓度和预期相符的表达产物,经层析纯化出Gly m Bd 28K蛋白,免疫新西兰大白兔,获得效价为1∶1.6×106多抗血清.
[Abstract]:RT-PCR cloned the main allergen Gly mBd28K gene, designed primers according to the sequence, amplified the open reading frame of the target gene, ligated with MBP vector, sequenced, and transformed into E. coli BL21DDE3. The recombinant protein was purified by affinity chromatography. The recombinant protein was purified by SDS-PAGE. The rabbit was immunized with polyantiserum and the titer was detected by ELISA method. The target gene fragment containing Gly mBd28K was amplified. The Gly mBd28K protein was purified by chromatography and immunized New Zealand white rabbits with the titer of 1: 1.6 脳 10 ~ 6 polyantiserum.
【作者单位】： 河南工业大学粮油食品学院;
【基金】：国家自然科学基金(31301409)
【分类号】：R392;Q943.2

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：1587317