白色念珠菌基因CaFSP1的功能研究和CaMCI4基因的敲除

发布时间：2018-04-01 00:07

  本文选题：白念珠菌　切入点：酿酒酵母　出处：《天津大学》2009年博士论文

【摘要】： 本研究克隆了酿酒酵母ScYMR034c的白色念珠菌同源基因CaFSP1,发现它编码一个411个氨基酸,与ScYMR034c编码的氨基酸序列一致性为57%,相似性为73%。根据DNA同源重组的原理,构建了CaFSP1的缺失菌株,其基因型得到PCR和Southern杂交的证实。表型研究发现CaFSP1基因的缺失导致细胞膜完整性受到破坏,造成白色念珠菌细胞对SDS、NaCl、CaCl2和KCl敏感,对LiCl、H2O2和ZnCl2产生耐受性,对抗真菌药物酮康唑和特比耐芬产生抗药性。此外,CaFSP1基因的缺失促进白色念珠菌在Spider培养基中菌丝的形成,但是局限了菌落向外周浸入生长的能力。引入克隆的CaFSP1基因能够恢复fsp1缺失株所有的表型。我们推测CaFSP1基因与白色念珠菌细胞的固醇和鞘脂的代谢有关,这两个成分对维持细胞膜正常功能和白色念珠菌的形态转化非常重要。我们还对CaFSP1在酵母中的同源基因ScYMR034c的功能进行了研究,发现酵母ymr34c△菌株也对NaCl和KCl敏感,但是CaFSP1不能互补ymr34c△酵母菌株的表型缺陷。我们还构建了酿酒酵母ymr34c△acr3△双基因缺失株,发现ymr34c△acr3△双基因缺失株和ymr34c△单倍体缺失株对酮康唑的敏感性和野生型对照没有差异,而酵母二倍体缺失株acr3△对酮康唑敏感。用同样的策略,我们还敲除了编码白色念珠菌线粒体中非常重要的电子传递载体NADH脱氢酶基因CaMCI4,为进一步研究CaMCI4基因的功能奠定了基础。
[Abstract]:It was found that the deletion of CaFSP1 gene was sensitive to SDS , NaCl , CaCl2 and KCl . It was found that the deletion of CaFSP1 gene was sensitive to NaCl and KCl .

【学位授予单位】：天津大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R379

【共引文献】

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本文编号：1693065