白念珠菌不同生物状态下ALS4、ALS9基因mRNA的表达

发布时间：2018-04-05 12:55

  本文选题：白念珠菌　切入点：ALS基因　出处：《青岛大学》2010年硕士论文

【摘要】： 目的：通过对白念珠菌酵母状态和芽管状态,以及浮游状态和生物膜状态下ALS4、ALS9基因mRNA表达水平的比较,探讨这两种基因在白念珠菌表型转换及生物膜形成中可能发挥的作用,为进一步研究白念珠菌的发病机制提供理论依据。 方法：选取3株标准株白念珠菌和10株临床株白念珠菌进行实验研究。白念珠菌酵母状态的培育和芽管状态的诱导以及浮游状态和生物膜状态的制备：GBS培养基,25℃振荡培养48h,收获酵母状态；pH7.0的RPMI-1640液体培养基,37℃震荡培养3h,收获芽管状态；体外6孔细胞培养板涂布小牛血清,RPMI-1640液体培养基,37℃静置培养48h,收获生物膜状态。液氮反复冻融加Trizol法提取不同生长状态白念珠菌的总RNA, RNA的纯度经紫外分光光度计A260/280比值估计,RT-PCR两步法扩增ALS4、ALS9基因mRNA,及内对照ACT1基因mRNA,扩增产物琼脂糖凝胶电泳,凝胶成像系统拍照。采用QuantityOne电泳分析软件对电泳条带进行分析,应用SPSS医学统计软件包两样本均数配对资料的t检验对实验数据进行统计学处理(以P0.05为显著性标准)。 结果：标准株白念珠菌芽管状态的ALS4基因mRNA(P0.05)和ALS9基因mRNA(P0.05)相对表达水平均明显高于酵母状态,临床株白念珠菌芽管状态的ALS4基因mRNA(P0.05)和ALS9基因mRNA(P0.05)相对表达水平均明显高于酵母状态；标准株白念珠菌生物膜状态的ALS4基因mRNA(P0.05)和ALS9基因mRNA(P0.05)相对表达水平均高于浮游状态,临床株白念珠菌生物膜状态的ALS4基因mRNA(P0.05)和ALS9基因mRNA(P0.05)相对表达水平均高于浮游状态。 结论：ALS4基因和ALS9基因可能在白念珠菌的酵母相向菌丝相转换和体外生物膜形成中起重要作用。
[Abstract]:Objective: to compare the mRNA expression levels of ALS4 and ALS9 genes in Candida albicans yeast and bud tube, and to explore the role of these two genes in phenotypic transformation and biofilm formation of Candida albicans.To provide theoretical basis for further study of the pathogenesis of Candida albicans.Methods: three standard strains of Candida albicans and 10 clinical strains of Candida albicans were selected for experimental study.The cultivation of Candida albicans and the induction of bud tube state as well as the preparation of planktonic state and biofilm state; the culture of RPMI-1640 liquid medium at 25 鈩，

本文编号：1714818