MyD88在OK-432诱导树突状细胞成熟中的作用
本文选题:树突状细胞 切入点:RNA 出处:《福建医科大学学报》2010年01期
【摘要】:目的探讨小鼠骨髓树突状细胞(DCs)髓性分化蛋白88(MyD88)在OK-432诱导DCs成熟中的作用机制。方法分离小鼠骨髓单核细胞(BMMCs),在含10%胎牛血清、重组小鼠粒-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)、重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)的培养体系中诱导培养,所得的细胞即为DCs。于培养的第5天,将细胞分为3组:对照组不加OK-432和MyD88 si RNA;OK-432组加入终浓度为5μg/mL的OK-432;RNA干扰组加入MyD88 si RNA12 h后,再加入5μg/mL OK-432刺激。半定量RT-PCR法检测DCs中MyD88的表达;ELISA法检测各组DCs分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-12的能力;MTT法检测DCs体外刺激同种混合淋巴细胞增殖的免疫活性。结果OK-432组DCs的MyD88高表达、TNF-α和IL-12释放明显增加并能诱导较强混合淋巴细胞反应,而用MyD88 si RNA干扰后以上效应均降低(P0.05)。结论靶向MyD88 si RNA可明显抑制小鼠DCs中MyD88的表达和OK-432诱导的DCs成熟,表明MyD88介导OK-432诱导的DCs成熟。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism of myeloid differentiation protein (MyD88) from mouse bone marrow dendritic cells (DCS) in DCs maturation induced by OK-432.Methods Mouse bone marrow monocytes were isolated and cultured in the culture system containing 10% fetal bovine serum, recombinant mouse granulocyte-macrophage colony stimulating factor (rmGM-CSFN) and recombinant mouse interleukin-4 (rmIL-4).The expression of MyD88 in DCs was detected by semi-quantitative RT-PCR method. The ability of DCs to secrete TNF- 伪 TNF- 伪 and IL-12 was detected by Elisa.Results the high expression of TNF- 伪 and IL-12 in DCs in OK-432 group was significantly increased and could induce a strong mixed lymphocyte reaction, but the above effects were decreased after MyD88 si RNA interference.Conclusion targeted MyD88 si RNA can significantly inhibit the expression of MyD88 in mouse DCs and DCs maturation induced by OK-432, suggesting that MyD88 mediates OK-432 induced DCs maturation.
【作者单位】: 福建医科大学基础医学院生理学与病理生理学系;河北省赵县人民医院;福建医科大学附属第一医院血液科;福建省中医药研究院;
【基金】:福建省自然科学基金(C0410020)
【分类号】:R392
【共引文献】
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【二级参考文献】
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,本文编号:1727722
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