1型糖尿病大鼠肾组织P38MAPK的表达变化及坎地沙坦的干预研究

发布时间：2018-04-12 11:50

  本文选题：糖尿病肾病 + P38丝裂原活化蛋白激酶　； 参考：《河北医科大学》2013年硕士论文

【摘要】：目的：通过链脲佐菌素腹腔注射诱导1型糖尿病大鼠模型，观察糖尿病大鼠肾脏P38丝裂原活化蛋白激酶（p38mitogen-activated protein kinases,P38MAPK）和转化生长因子β（transforming growth factor β,TGF-β）的表达水平，同时给予坎地沙坦干预，探讨P38MAPK、TGF-β与糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)的关系，及坎地沙坦的肾脏保护作用机制。 方法： 1.雄性Wistar大鼠36只，，适应性喂养一周后，随机分为三组：正常对照组（NC组，n=12），糖尿病组（DM组，n=12）和坎地沙坦干预组（DM-C组，n=12）。DM组和DM-C组大鼠禁食12h后，一次性腹腔注射链脲佐菌素50mg/Kg，构建1型糖尿病大鼠模型；3天后测大鼠随机血糖大于16.7mmol/L为造模成功；NC组给予等容积柠檬酸缓冲液一次性腹腔注射。 2. DM-C组给予坎地沙坦5mg·kg-1·d-1灌胃，NC组和DM组给予等容积生理盐水灌胃。干预12周末，全部大鼠置于代谢笼中收集24h尿液，并记录尿量，用来测定尿白蛋白排泄量（urinary albumin excretion，UAE）、尿肌酐；全部大鼠称重，留取血标本，测空腹血糖（fasting blood glucose，FBG）、血肌酐、血清尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）、总胆固醇（totalcholesterol，TC）和甘油三酯（triglycerides，TG），计算内生肌酐清除率（creatinine clearance rate，Ccr）；切取右肾，去掉被膜后称重，计算肾重指数（kidney weight index，KW/BW），光镜和透射电镜下观察肾脏病理学改变，免疫组化法观察肾小球及肾小管p-P38MAPK和TGF-β的表达，并应用细胞医学图像分析系统（CMIAS-2011）对免疫组化切片进行分析，计算各组指标灰度值；其余肾组织迅速置于-70℃冰箱中冻存，RT-PCR检测肾脏P38MAPK和TGF-β mRNA的表达水平。 结果：实验结束时，NC组、DM组、DM-C组分别存活12只、10只、9只大鼠。 1. FBG、Ccr、BUN、UAE、KW/BW：与NC组相比，DM组和DM-C组大鼠FBG、Ccr、BUN、UAE、KW/BW均显著升高（P均＜0.01）；与DM组相比，DM-C组大鼠UAE、KW/BW明显降低（P＜0.01，P＜0.05）。 2. TG、TC：与NC组相比，DM组和DM-C组大鼠TG、TC均显著升高（P均＜0.01）；与DM组相比，DM-C组大鼠TG、TC明显降低（P＜0.01，P＜0.05）。 3.肾脏病理形态学改变：光镜下显示：与NC组相比，DM组和DM-C组大鼠肾小球系膜细胞增生，肾小球系膜区增宽，系膜基质增多，肾小球内PAS阳性染色物质增多，部分肾小管结构紊乱；DM-C组较DM组大鼠上述病变减轻，但仍未恢复正常。透射电镜下显示：与NC组相比，DM组大鼠肾小球基底膜不均匀增厚，部分足突出现断裂、融合；DM-C组较DM组大鼠肾小球基底膜增厚程度及足突断裂、融合程度有所减轻。 4.免疫组化结果： NC组大鼠肾小球及肾小管有少量p-P38MAPK、TGF-β表达，DM组较NC组肾小球及肾小管p-P38MAPK、TGF-β表达明显增强（P＜0.01，P＜0.01）；DM-C组较DM组肾小球及肾小管p-P38MAPK、TGF-β表达明显减弱（P＜0.01，P＜0.01），但较NC组表达仍高（P＜0.01，P＜0.01）。 5. RT-PCR检测结果：NC组大鼠肾皮质有少量P38MAPK、TGF-βmRNA的表达，DM组较NC组肾皮质的P38MAPK、TGF-βmRNA表达明显增强（P＜0.01，P＜0.01）；DM-C组较DM组肾皮质P38MAPK、TGF-βmRNA表达明显减弱（P＜0.01，P＜0.05），但较NC组表达仍高（P＜0.01，P＜0.05）。 结论： 1.糖尿病大鼠肾组织中P38MAPK及TGF-β的表达增加。 2.坎地沙坦可通过下调糖尿病大鼠肾脏组织中P38MAPK及TGF-β的表达，改善其肾脏的病理损伤，减少24小时UAE，从而发挥肾脏保护作用。
[Abstract]:Objective: through intraperitoneal injection of streptozotocin induced type 1 diabetic rat model, observe the kidney of diabetic rats P38 mitogen activated protein kinase (p38mitogen-activated protein, kinases, P38MAPK) and transforming growth factor beta (transforming beta growth factor, TGF-) expression levels, while giving candesartan intervention study, P38MAPK, TGF- beta and diabetic nephropathy (diabetic nephropathy, DN) the relationship between renal protective mechanism and candesartan.
Method锛

本文编号：1739607