huMSCs、huMSCs源生殖样细胞免疫学特性的实验研究

发布时间：2018-04-20 18:32

  本文选题：脐带 + 间充质干细胞　； 参考：《汕头大学》2010年硕士论文

【摘要】：目的:研究人脐带间充质干细胞(Human Umbilical Cord Wharton’s Jelly-derived Mesenchymal Stem Cells ,huMSCs)及其诱导分化为生殖样细胞后的免疫学特性,为进一步研究huMSCs移植特性提供实验依据。 方法:分离培养huMSCs,在生殖细胞培养条件下定向诱导其分化,倒置相差显微镜下观察诱导后细胞形态。采用FACScan流式细胞仪检测诱导前后huMSCs表面抗原CD40、CD40L、CD80、CD86。半定量RT-PCR检测诱导前后huMSCs的HLA-I、HLA-DR基因表达水平的变化。用CCK-8法检测诱导前后的不同数量级huMSCs对混合淋巴细胞反应体系中经植物血凝素(PHA)激活的同种异体外周血淋巴细胞(PBMC)增殖的影响。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测诱导前后huMSCs对经PHA活化的T细胞分泌IFN-γ的影响。 结果: huMSCs在生殖细胞培养条件下能分化为生殖样细胞,诱导前后的huMSCs均表达HLA-I,不表达CD40、CD40L、CD80、CD86和HLA-DR。huMSCs能抑制经PHA激活的T淋巴细胞增殖,并抑制T淋巴细胞IFN-γ的分泌,但huMSCs源生殖样细胞并不能抑制经PHA激活的T淋巴细胞增殖及IFN-γ的分泌。 结论: huMSCs在体外生殖细胞培养条件定向诱导下,可分化为生殖样细胞,这种细胞与huMSCs一样具有低免疫原性,同时huMSCs在体外具有免疫抑制性,但诱导获得的huMSCs源生殖样细胞不能抑制T细胞的增殖。
[Abstract]:Aim: to study the immunological characteristics of human Umbilical Cord Wharton's Jelly-derived Mesenchymal Stem Cells cells (HMSCs) and its differentiation into reproductive like cells, and to provide experimental evidence for further study on the characteristics of huMSCs transplantation. Methods: huMSCs were isolated and cultured, and the differentiation was induced under germ cell culture condition. The morphology of induced cells was observed under inverted phase contrast microscope. FACScan flow cytometry was used to detect huMSCs surface antigen CD40, CD40, CD40, and CD80, CD86, before and after induction. Semi-quantitative RT-PCR was used to detect the changes of HLA-DR gene expression in huMSCs before and after induction. The effects of different orders of huMSCs before and after induction on the proliferation of PBMCs activated by phytohemagglutinin (PHA) in peripheral blood lymphocytes (PBMCs) were detected by CCK-8 method. Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) was used to detect the effect of huMSCs on the secretion of IFN- 纬 by PHA activated T cells before and after induction. Results: huMSCs could differentiate into reproductive like cells under the condition of germ cell culture. HLA-I was expressed in huMSCs before and after induction. CD40 CD40L, CD80, CD86 and HLA-DR.huMSCs could inhibit the proliferation of T lymphocytes activated by PHA, and inhibit the secretion of IFN- 纬 of T lymphocytes. However, huMSCs derived reproductive cells could not inhibit the proliferation of T lymphocytes activated by PHA and the secretion of IFN- 纬. Conclusion: huMSCs can differentiate into reproductive like cells under the condition of germ cell culture in vitro. This kind of cells has the same low immunogenicity as huMSCs, and huMSCs has immunosuppressive effect in vitro. But the huMSCs derived reproductive cells could not inhibit the proliferation of T cells.
【学位授予单位】：汕头大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R392.1

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