主动外排系统介导鲍曼不动杆菌耐药性研究
本文选题：鲍曼不动杆菌 + 主动外排 ； 参考：《重庆医科大学》2008年硕士论文
【摘要】： 鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Ab)是一种条件致病菌,主要导致肺炎、泌尿系感染、脑膜炎等疾病,为重要的医院感染病原菌。近年来随着抗菌药物的临床广泛应用,其耐药现象日趋严重。因此有关该菌对抗菌药物耐药机制的研究以及如何减少耐药株的产生已成为当前该领域关注的热点。 研究表明,鲍曼不动杆菌可以通过产生修饰酶、基因突变、整合子基因扩散、菌膜通透性降低等多种方式形成对抗菌药物的耐药性。然而细菌耐药的另一重要机制——药物主动外排机制在鲍曼不动杆菌耐药性中的作用尚未得以充分阐明。目前仅有少数研究初步证实了鲍曼不动杆菌可能存在主动外排泵AbeABC及AbeM,对主动外排泵的编码基因介导鲍曼不动杆菌耐药性研究未见报道。本实验通过研究编码主动外排泵AbeABC的结构基因adeB和编码主动外排泵AbeM的基因abeM在鲍曼不动杆菌临床分离株中的分布与表达,初步探讨了主动外排机制在介导鲍曼不动杆菌耐药性中的作用。 实验中采用琼脂稀释法检测了8种临床常用抗菌药物对37株鲍曼不动杆菌临床分离株的最低抑菌浓度( Minimal inhibitory concettrantion,MIC),测定了经外排泵抑制剂碳酰氰基-对-氯苯腙(Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone,CCCP)处理前后抗菌药物MIC的变化,并采用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)、逆转录-聚合酶链反应(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)检测所有实验菌株编码主动外排泵的基因及其表达水平。 实验结果显示:鲍曼不动杆菌临床分离株对多种临床常用抗菌药物均有不同程度的耐药,且耐药率高,并出现较多的多重耐药菌。经外排泵抑制剂CCCP处理后,抗菌药物对鲍曼不动杆菌MIC有不同程度降低。所有实验菌株均能检测到编码主动外排系统的基因adeB和abeM,其多重耐药株的编码基因表达水平均明显高于单一耐药株(P0.05)和敏感菌株(P0.01)。 实验结果表明:鲍曼不动杆菌耐药形势严峻,多重耐药性(Multidrug resistance,MDR)日趋明显。多种临床常用抗菌药物对鲍曼不动杆菌临床分离株的体外抗菌活性差,8种抗菌药物中仅碳青霉烯类对该菌有较强的抗菌活性。鲍曼不动杆菌临床分离株普遍存在主动外排泵,外排泵编码基因adeB和abeM的高表达可能是导致鲍曼不动杆菌发生多重耐药的机制之一。
[Abstract]:In recent years , with the widespread use of antibacterial drugs , the drug resistance has become more and more serious in recent years . Therefore , the research on the mechanism of drug resistance to antibiotics and how to reduce the production of resistant strains has become a hot spot in the field .
In this study , the distribution and expression of AbeABC and AbeM genes encoding active efflux pumps have not been fully elucidated .
In the experiment , the minimal inhibitory concentration ( MIC ) of 8 clinically common antibacterial drugs against 37 strains of acinetobacter baumanii was detected by agar dilution method . The changes of MIC of antibacterial drug before and after treatment with efflux pump inhibitor carbamyl - p - chlorophenylhydrazone ( CCCP ) were determined . Polymerase chain reaction ( PCR ) , reverse transcription - polymerase chain reaction ( RT - PCR ) were used to detect the gene and expression level of active efflux pump .
The results showed that the clinical isolates of acinetobacter baumandii had different degrees of resistance to various clinical commonly used antibacterial drugs , and the drug resistance rate was high and multiple resistant strains appeared . After treatment with CCCP inhibitor , the MIC of the antibacterial drugs was reduced to some extent . All the experimental strains could detect the gene adeB and abeam of the active efflux system , and the expression level of the coding genes of the multiple resistant strains was significantly higher than that of the single resistant strain ( P0.05 ) and the sensitive strain ( P0.01 ) .
The results showed that the drug resistance of acinetobacter baumanii was severe and multidrug resistance ( MDR ) was more and more obvious .
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R378.99
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，本文编号：1816865
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