GLP-1对骨骼肌细胞糖原合成酶表达的影响及其与MAPK信号途径的研究

发布时间：2018-05-05 01:13

  本文选题：胰高血糖素样肽-1 + 糖原合成酶　； 参考：《天津医科大学》2009年硕士论文

【摘要】： 目的: 1.以体外培养L6骨骼肌细胞为对象,给予一定浓度胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)干预,检测GLP-1对糖原合成酶表达的影响。 2.利用UO126(MAPK抑制剂)阻断MAPK信号转导通路,检测GLP-1对L6骨骼肌细胞糖原合成酶表达的影响,从而探讨GLP-1在骨骼肌细胞中介导糖原合成的信号转导通路。 3.为GLP-1的拟胰岛素作用及其机制提供理论依据。 方法: 1.复苏L6骨骼肌细胞,通过倒置显微镜观察其生长及增值状况。 2.L6骨骼肌细胞均等分为6组:A:对照组;B:GLP-1(10~(-9)mol/L)组;C:GLP-1(10~(-9)mol/L)+UO126(10μmol/L)组;D:胰岛素(10~(-9)mol/L)组;E:胰岛素(10~(-9)mol/L)+UO126(10μmol/L)组;F:GLP-1(10~(-9)mol/L)+胰岛素(10~(-9)mol/L)组。A、B、C、D、E和F 6组分别培养3分钟、30分钟,A、B、D和F组再培养24小时。 3.用Western Blot和免疫组织化学方法检测骨骼肌细胞中的糖原合成酶的表达。 结果: 1.GLP-1(10~(-9)mol/L)组在3分钟、30分钟及24小时干预的糖原合成酶的表达均显著高于对照组(分别为1997.33±115.47vs 1444.00±94.64,P0.05;1465.33±86.00 vs1267.33±66.46,P0.05;1426.67±24.54 vs1326.33±18.84,P0.05,n=3)。 2.GLP-1(10~(-9)mol/L)+胰岛素(10~(-9)mol/L)组在3分钟、30分钟及24小时干预的糖原合成酶的表达均显著高于对照组(分别为2209.33±186.18vs 1444±94.64,P0.05;1565.00±15.39 vs1267.33±66.46,P0.05;1428.00±36.51 vs1326.33±18.84,P0.05,n=3)。 3.3分钟和30分钟时,GLP-1(10~(-9)mol/L)+UO126(10μmol/L)组的糖原合成酶表达均显著低于GLP-1(10~(-9)mol/L)组(分别为1752.67±198.65 vs1997.33±115.47,P0.05;1395.33±78.21 vs1465.33±86.00,P0.05,n=3),而在30分钟时的糖原合成酶表达显著高于对照组(1395.33±78.21 vs1267.33±66.46,P0.05,n=3)。 结论: 本研究通过体外实验证实GLP-1可直接作用于骨骼肌细胞,上调糖原合成酶的表达,并且这种作用可以维持较长一段时间。MAPK抑制剂能够阻断GLP-1在骨骼肌细胞中介导的糖原合成酶的上调表达,表明MAPK通路可能对GLP-1在骨骼肌细胞中介导的糖原合成酶的上调表达发挥着重要作用。
[Abstract]:Objective: 1. L6 skeletal muscle cells were cultured in vitro and treated with glucagon-like peptide-1 GLP-1 (glucagon-like peptide-1). The effect of GLP-1 on the expression of glycogen synthase was detected. 2. The effect of GLP-1 on the expression of glycogen synthase in L6 skeletal muscle cells was detected by blocking MAPK signal transduction pathway by UO126(MAPK inhibitor, and the signal transduction pathway mediated by GLP-1 in skeletal muscle cells was explored. 3. To provide theoretical basis for the insulin-like action of GLP-1 and its mechanism. Methods: 1. After resuscitation of L 6 skeletal muscle cells, the growth and proliferation of L 6 skeletal muscle cells were observed by inverted microscope. 2.L6楠ㄩ�艰倢缁嗚優鍧囩瓑鍒嗕福�

本文编号：1845517