球形孢子丝菌DNA提取方法的比较

发布时间：2018-08-17 19:03

【摘要】：目的获得一种高效、快速、简便的提取球形孢子丝菌DNA的方法。方法以不同地区来源的球形孢子丝菌为实验材料,采用CTAB法、异硫氰酸胍法、试剂盒法、碱裂解法4种方法分别提取球形孢子丝菌DNA。通过紫外吸光度法测定DNA的浓度和纯度,琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增评价DNA的质量。结果虽然不同方法均可得到球形孢子丝菌的DNA,但碱裂解法获得DNA的浓度和纯度明显优于其他3种方法。利用钙调蛋白基因的引物对DNA进行PCR扩增后,各样本均出现阳性条带,且条带亮度较好。结论碱裂解法是获得高质量球形孢子丝菌DNA的理想方法。
[Abstract]:Objective to obtain an efficient, rapid and simple method for the extraction of DNA from Sporocystis globosa. Methods DNAs from different regions were extracted by CTAB method, guanidine isothiocyanate method, Kit method and alkali lysis method respectively. The concentration and purity of DNA were determined by ultraviolet spectrophotometry and the quality of DNA was evaluated by agarose gel electrophoresis. Results although the DNA of S.globosa could be obtained by different methods, the concentration and purity of DNA obtained by alkaline lysis were obviously superior to those of the other three methods. After PCR amplification of DNA with calmodulin gene primer, positive bands were found in all samples, and the brightness of the bands was good. Conclusion Alkali lysis method is an ideal method for obtaining high quality DNA of Sporothrix globosa.
【作者单位】： 吉林大学第一医院皮肤性病科;
【基金】：国家自然科学基金(81171509) 吉林省科技厅科技创新人才培育计划(20150520039JH)
【分类号】：R379.9

【参考文献】

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2 陈官芝 ,徐秀莲 ,吴延芳 ,王云 ,罗兵;致病性真菌DNA提取方法的实验研究[J];中华皮肤科杂志;2002年05期

3 孔祥明,林俊萍,王雅坤,陈洪铎;申克孢子丝菌基因差异、致病力与孢子丝菌病临床型别的关系[J];中华皮肤科杂志;2005年06期

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5 李晓红,陈世义,钟淑霞,付爱华,赵翠杨;研磨-CTAB法与碱性异硫氰酸胍沸腾法提取真菌DNA的比较分析[J];中国实验诊断学;2005年03期

【共引文献】

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4 孔明惠;曹佐武;徐放;;一种高效干冻研磨破碎酵母细胞的方法[J];安徽农业科学;2010年29期

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6 张慧丽;徐瑛;段维军;王江岭;顾建锋;;番石榴黑斑病病原菌的分离鉴定[J];安徽农业科学;2011年28期

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【二级参考文献】

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1 刘小勇,田素忠,秦国夫,沈瑞祥;提取植物和微生物DNA的SDS-CTAB改进法[J];北京林业大学学报;1997年03期

2 唐良华;苏敏;郑丹华;陈庭芳;黄丽梅;;食用菌总DNA提取方法的研究[J];福建轻纺;2006年01期

3 佘菲菲，沈建箴，吕联煌，，陈月秀，郑秀芬;快速高效提取白色念珠菌DNA[J];福建医学院学报;1996年03期

4 张林琳;李磊;李翔;贺大林;朱国栋;王新阳;;一种改良式质粒DNA提取方法的建立与应用[J];西安交通大学学报(医学版);2007年01期

5 殷跃军;左示敏;王辉;张亚芳;陈宗祥;马玉银;顾世梁;潘学彪;;抗水稻纹枯病qSB-9~(Tq)基因效应及作用方式分析[J];作物学报;2009年02期

6 李绍兰,周斌,杨丽源,李治滢,张琦,陈有为;真菌DNA提取方法的改良[J];云南大学学报(自然科学版);2002年06期

7 姚伟;周会;徐景升;余爱丽;张木清;陈如凯;;质粒DNA小量提取法的改进[J];应用与环境生物学报;2005年06期

8 戴文英,孙亦新;蜗牛酶对白念珠菌抗菌作用的研究[J];中国皮肤性病学杂志;1992年03期

9 肖勇;李双成;初明光;周鹏;关鹏;柳莉;王玲霞;郑爱萍;李平;;水稻立枯丝核菌G蛋白β亚基基因的克隆、表达及序列分析[J];中国水稻科学;2008年05期

10 陈官芝,刘维达;一种丝状真菌DNA提取方法的介绍[J];中华皮肤科杂志;2000年03期

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3 宋振巧;王明明;王建华;王洪刚;;丹参DNA提取方法比较[J];中国野生植物资源;2008年01期

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5 庞广昌;一种简单快速的DNA提取方法[J];天津商学院学报;2000年03期

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4 何佳春;王渭霞;傅强;;稻米及玉米制品的DNA提取方法的研究[A];粮食安全与植保科技创新[C];2009年

5 张上隆;;一种木本果树基因组DNA提取方法研究[A];张上隆果树学文选[C];2006年

6 谢响明;倪峥飞;陈芝兰;;麦草浆污泥总DNA提取方法的改进及其宏基因组文库构建的初步研究[A];2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2006年

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本文编号：2188593