表皮干细胞对角质形成细胞增殖的影响

发布时间：2018-11-02 16:53

【摘要】： [目的]表皮干细胞作为皮肤发生修复重建的关键源泉,其生物学作用尚不清楚。本实验通过探讨表皮干细胞对角质形成细胞的黏附、增殖等生物学行为的影响,进一步揭示表皮干细胞在组织修复过程中可能的生物学作用。 [方法]以Ⅳ胶原作为底物,培养表皮细胞。利用Ⅳ胶原的快速黏附法分离培养表皮干细胞。然后利用免疫细胞化学分别对角蛋白19和β1整合素进行鉴别。将制备的表皮细胞悬液接种在包被有Ⅳ胶原24孔板上(共6板)。随机分为2组:A组为未弃掉表皮干细胞组,B组为弃掉表皮干细胞组。制备好表皮细胞悬液后,调整细胞密度为1×10~5/ml,接种于铺有Ⅳ胶原的24孔板上。温箱内孵育15分钟后吸掉其中B组的上清液,调整细胞密度为1×10~5/ml后接种在24孔板上继续作角质形成细胞的培养。分别取培养1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天细胞每天取4孔在显微镜下进行细胞计数,取其平均值,绘制生长曲线图。 [结果]培养出来的表皮干细胞通过鉴定角蛋白19和β1整合素均有阳性表达;显微镜下可见A组(未弃掉表皮干细胞组)细胞在第2天即可看到大部分细胞贴壁,第3天可见细胞成集落样生长,且在第6天时大部分细胞连成片;而B组(弃掉表皮干细胞组)细胞贴壁相对缓慢,且形成的集落小而少。通过绘制生长曲线可见A组(未弃掉表皮干细胞组)细胞较B组(弃掉表皮干细胞组)细胞生长速度要快,并且在各时像点细胞数均高于对照组。 [结论]表皮干细胞对角质形成细胞的增殖有正性调节作用,表皮干细胞可能通过分泌某种“表皮干细胞因子”对角质形成细胞发挥作用。
[Abstract]:Objective: the biological function of epidermal stem cells as the key source of skin repair and reconstruction is unclear. In this study, the effects of epidermal stem cells on the adhesion and proliferation of keratinocytes were studied to reveal the possible biological role of epidermal stem cells in tissue repair. [methods] the epidermal cells were cultured with collagen 鈪，

本文编号：2306388