基于抗大豆苷单克隆抗体的Ic-ELISA方法的建立

发布时间：2018-12-16 22:51

【摘要】：目的:建立大豆苷的快速免疫分析检测方法。方法:该研究通过大豆苷单克隆抗体与葛根素、芦丁等共9种中药小分子的交叉反应证明该抗体具有特异性,并以制备出的大豆苷特异性单克隆抗体为基础,建立了大豆苷间接竞争酶联免疫分析方法(Ic-ELISA),并用此方法检测大豆中大豆苷的含量。结果:抗体与葛根素的交叉反应率为115%,与芦丁、甘草酸、栀子苷等小分子无交叉反应。该方法线性范围为10~10 000 ng·m L-1,孔内差和板间差均小于6.3%,平均回收率为105.4%%。采用该方法检测大豆中大豆苷的含量,所得结果与HPLC法的结果一致。结论:该研究建立了大豆苷的Ic-ELISA方法,可为含大豆苷的中药及复方的质量控制分析提供更加快速灵敏的检测方法。
[Abstract]:Objective: to establish a rapid immunoassay method for detection of daidzein. Methods: the cross-reaction of daidzein monoclonal antibody with puerarin, rutin and other Chinese medicine small molecules proved that the antibody was specific and based on the prepared daidzein specific monoclonal antibody. An indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay (Ic-ELISA) was established for the determination of daidzein in soybean. Results: the cross reaction rate between antibody and puerarin was 115, and there was no cross reaction with rutin, glycyrrhizic acid, geniposide and other small molecules. The linear range of the method is 10 ~ 10 000 ng ml ~ (-1), the difference between holes and plates is less than 6.3, and the average recovery is 105.4%. The content of daidzein in soybean was determined by this method, and the results were consistent with those obtained by HPLC method. Conclusion: a Ic-ELISA method for the determination of daidzein was established, which can provide a more rapid and sensitive method for the quality control analysis of daidzein in traditional Chinese medicine and compound.
【作者单位】： 北京中医药大学中药学院;北京中医药大学"经典方剂的应用基础研究"创新团队;北京中医药大学科研实验中心;北京中医药大学基础医学院;
【基金】：国家自然科学基金项目(81373542,81274043)
【分类号】：R392-33

【参考文献】

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1 徐春华;张治广;谢明杰;;大豆异黄酮的抗氧化和抗肿瘤活性研究[J];大豆科学;2010年05期

2 高荣海;张春红;赵秀红;郑艳;刘长江;;大豆异黄酮研究进展[J];粮食与油脂;2009年05期

3 郭艳艳;王俊儒;薛亚峰;;葛根中大豆苷的分离纯化工艺研究[J];西北农业学报;2009年01期

4 袁建平;王江海;刘昕;;大豆异黄酮的重要代谢产物——马雌酚[J];中国药学杂志;2006年07期

5 金文姗,谈钰元,陈有根,王妍;高效液相色谱法测定不同产地葛根中葛根素、大豆苷及大豆苷元的含量[J];中国中药杂志;2003年01期

6 梁洁,甄汉深;大豆化学成分与开发价值的研究[J];中医药学刊;2003年09期

7 张越;屈会化;吴婷婷;薛瑾;孙晔;孙慧;李翼飞;赵琰;王庆国;;甘草酸单克隆抗体的制备与鉴定[J];药物分析杂志;2013年05期

8 苏歆;屈会化;赵琰;孙慧;孙晔;王雪茜;王庆国;;基于黄芩苷单克隆抗体的ELISA快速检测方法的建立[J];药物分析杂志;2013年06期

9 薛瑾;屈会化;孙晔;张越;王雪茜;续洁琨;赵琰;王庆国;;绿原酸人工抗原的合成及多克隆抗体的制备[J];中草药;2014年04期

10 屈会化;赵妍;苏歆;贺娜娜;孙晔;孔慧;赵琰;王庆国;;芍药苷人工抗原的合成与鉴定[J];中国中药杂志;2014年11期

【共引文献】

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3 宋艳秋;陈有为;;红曲霉转化中药葛根转化产物的提取工艺研究[J];安徽农业科学;2010年19期

4 李玉珍;肖怀秋;林亲录;;大豆蛋白复合酶解产物在促微生物生长和发酵中的初步应用研究[J];氨基酸和生物资源;2010年03期

5 王跃强;孙国娟;崔洁;崔承弼;马凤鸣;;不同大豆品种的抗氧化性研究[J];现代农业科技;2011年20期

6 刘计权;刘亚明;裴香萍;刘必旺;李慧峰;;山西产葛根总黄酮及3种异黄酮含量的测定[J];中华中医药杂志;2012年02期

7 成志远;倪鑫;樊进茹;赵慧;王铭;王秀伶;;肠道肠球菌AUH-HM195原生质体制备与再生条件初探[J];河北农业大学学报;2010年02期

8 马冬雪;刘玉良;;甘肃陇南栽培葛根有效成分葛根素含量的分析研究[J];河北农业大学学报;2010年03期

9 徐春华;张治广;谢明杰;;大豆异黄酮的抗氧化和抗肿瘤活性研究[J];大豆科学;2010年05期

10 何恩铭;李惠华;常强;王伟;徐剑;;超声波法提取豆渣中大豆异黄酮的工艺研究[J];大豆科学;2011年04期

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1 王洋;张玉梅;;雌马酚人体代谢的研究进展[A];营养与慢性病——中国营养学会第七届理事会青年工作委员会第一次学术交流会议论文集[C];2010年

2 侯士果;王书妍;李洪霞;柴金玲;谷学新;;反相高效液相色谱法测定莱葛颗粒中葛根素的含量[A];第十五次全国色谱学术报告会文集（下册）[C];2005年

3 王庆国;赵琰;屈会化;;中药小分子单克隆抗体技术平台的建立[A];“新成果·新进展·新突破”中华中医药学会2013年学术年会、第三次中华中医药科技成果论坛论文集[C];2013年

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1 杨红;异黄酮苷元防治AD及抑制Aβ神经毒作用的分子机制研究[D];暨南大学;2010年

2 曹长姝;中药臭灵丹中HTMF体外抗肿瘤机制研究[D];暨南大学;2011年

3 刘火安;葛根等中药材高效液相色谱指纹图谱的研究[D];重庆大学;2006年

4 刘元法;凹凸棒石油脂脱色机理及其对油脂品质的影响研究[D];江南大学;2007年

5 李海燕;大豆异黄酮的开发及其物质基础的研究[D];吉林大学;2012年

6 孟杰;几种农副产品饲料的化学成分、能量价值和饲喂肉牛的生长性能与肉品质比较[D];中国农业大学;2014年

7 任国峰;大豆异黄酮抑制前列腺增生的作用及其机理研究[D];中南大学;2013年

8 米仁沙·牙库甫;复方小艾飞蜜膏抑制胃癌药效物质基础研究[D];新疆医科大学;2014年

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2 赵桂琴,尹志峰,陈四平;大孔树脂在中草药有效成分提取中的应用[J];承德医学院学报;2003年02期

3 钟兴刚;刘淑娟;李维;谭正初;杨拥军;;茶叶中黄酮类化合物对羟自由基清除实现抗氧化功能研究[J];茶叶通讯;2009年04期

4 杨茂区;陈伟;冯磊;;大豆异黄酮的生理功能研究进展[J];大豆科学;2006年03期

5 全吉淑;汪霞;许惠仙;尹学哲;;大豆皂醇抗结肠癌作用的研究[J];大豆科学;2009年01期

6 汪霞;许惠仙;全吉淑;尹学哲;;大豆异黄酮甙元对结肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的影响[J];大豆科学;2009年02期

7 曲丽萍;范国荣;宓鹤鸣;孙亮;;反相高效液相制备色谱法分离淡豆豉中的大豆苷、黄豆苷、染料木苷[J];第二军医大学学报;2006年03期

8 任慧玲;张勇;朱宇旌;;异黄酮类化合物精制方法的研究现状[J];饲料工业;2006年22期

9 张江义,卢爱民,张国栋,胡圣虹,帅琴;AB-8型大孔树脂分离提纯葛根素的研究[J];分析试验室;2005年11期

10 朱玉强;;天然抗氧化剂研究进展[J];甘肃石油和化工;2008年02期

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1 杜成林,丁杏苞;大豆茎化学成分研究[J];中草药;2002年12期

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3 曲丽萍;范国荣;宓鹤鸣;孙亮;;反相高效液相制备色谱法分离淡豆豉中的大豆苷、黄豆苷、染料木苷[J];第二军医大学学报;2006年03期

4 范新美;董慧茹;;溶剂浮选法分离富集葛根中大豆甙元的研究[J];分析试验室;2006年09期

5 代丽萍;石任兵;;HPLC-PDA法测定芪芍方有效部位中葛根素、大豆苷、芍药苷的含量[J];北京中医药大学学报;2010年03期

6 王智森;高飞;安丽娜;盖树常;纪玉哲;;培根胶囊的质量标准研究[J];中国药房;2012年07期

7 ;[J];;年期

8 ;[J];;年期

9 ;[J];;年期

10 ;[J];;年期

，

本文编号：2383176