鼠IFN-λ2腺病毒载体建立及体外活性研究

发布时间：2018-12-29 11:33

【摘要】： 目的：克隆鼠IFN-λ2基因,构建其腺病毒载体,获取病毒重组子,并研究其生物学活性。 方法：用人水疱口炎病毒VSV(vesicular stomatovirus)病毒诱导小鼠原代脾细胞表达IFN-λ2,通过RT-PCR获取IFN-λ2 cDNA,将其亚克隆至pShuttle-CMV载体,经PmeⅠ线性化后,与腺病毒的骨架载体pAdEasy在BJ5183菌中同源重组,293A细胞包装扩增,免疫荧光、Western blot检测mIFN-λ2蛋白的表达。mIFN-λ2对鼠肺腺癌细胞LA795的抑制作用,通过MTT细胞存活实验检测活性。 结果：获取鼠IFN-λ2的cDNA,序列与GeneBank公布序列完全一致,成功构建腺病毒载体；MTT法研究Ad-mIFN-λ2和Ad-Lacz对小鼠肺腺癌细胞LA795的体外抑制作用,结果显示mIFN-λ2对LA795细胞生长具有一定的抑制作用。 结论：成功构建mIFN-λ2的重组腺病毒载体,其病毒重组子体外具有生物活性。
[Abstract]:Aim: to clone mouse IFN- 位 2 gene, construct its adenovirus vector, obtain recombinant virus and study its biological activity. Methods: human vesicular stomatitis virus (VSV (vesicular stomatovirus) virus induced the expression of IFN- 位 2 in primary spleen cells of mice. IFN- 位 2 cDNA, was obtained by RT-PCR and subcloned into pShuttle-CMV vector. The expression of IFN- 位 2 cDNA, was linearized by Pme 鈪，

本文编号：2394771