创伤与非创伤性应激对大鼠循环血内皮祖细胞的影响

发布时间：2019-03-29 11:19

【摘要】： [目的】 内皮祖细胞(endothelial progenitor cells, EPCs)的研究越来越受到关注。EPCs不仅维持正常脉管系统的生理功能,而且主导病理状态下的血管再生与修复。但目前对于颅脑创伤后的血管生成研究尚不多见。本研究组前期研究发现了颅脑创伤(traumatic brain injury, TBI)患者循环血中EPCs随病程呈先低后高的变化规律,本研究拟对比研究TBI以及非创伤应激对大鼠循环血EPCs动态变化的影响,以确立TBI大鼠EPCs是否为特异性变化,并探索可能影响其变化的因素,为进一步治疗干预TBI提供可参考的理论依据。 [材料与方法] 健康成年雄性Wistar大鼠36只(体重250-300g,鼠龄7周),分为脑创伤组(TBI)、电休克组(electroconvulsive shock, ECS)、冷水游泳组(cold water swim,CWS)和正常对照组(control,CON)。TBI模型建立：在颅骨前囟后3mm,矢状缝侧方2mm钻直径3mm的骨孔,应用大鼠液压(Fluid-Percussion injury, FPI)打击仪以1atm的打击力度致伤；ECS组建立：在大鼠清醒状态下,用鼠耳夹电极分别夹住生理盐水湿润的鼠耳,给予电刺激,刺激电流强度为90mA,时间1秒。刺激后大鼠立即意识不清,并出现持续数秒的身体及四肢强直痉挛；CWS组建立：在直径1.5米的圆柱形容器中储4℃水20cm深,放置清醒大鼠持续游泳3分钟。分别于创伤或其他应激实施前24h和实施后3h、6h、24h、48h、72h、168h、取大鼠内眦球后静脉丛血液约0.6ml,采用Ficoll密度梯度离心法分离大鼠循环血单个核细胞,以CD34、CD133双抗体阳性作为EPCs标志,应用流式细胞仪(flow cytometer, FCM)测定大鼠循环血中EPCs数量。应用小动物血细胞分析仪完成其他血细胞的测定。 [结果] 1.大鼠循环血中存在表达CD34/CD133双阳性的EPCs,正常大鼠循环血中EPCs为33～57个／20万单个核细胞,平均为42个／20万单个核细胞。 2.脑创伤后,大鼠血中EPCs3小时明显下降到正常值以下(创伤前的36.96%),至10-24个／20万单个核细胞；然后迅速升高,到6小时明显超过正常水平(比创伤前增高60.54%),24小时再回落到正常水平,P0.05。 3.电刺激后,大鼠循环血EPCs3小时也明显增高(增高56.92%),持续到24小时达高峰(增高78.61%),到72小时回到正常水平。P0.05。 4.冷刺激后,大鼠循环血EPCs3小时就明显增高(增高38.31%),持续到48小时,6小时(增高64.74%)和24小时最明显(增高79.21%),72小时降低回到正常水平。P0.05。 5.三个实验组应激后各时间点的EPCs变化与对照组比较,其差异有统计学意义。 6.TBI、ECS、CWS后大鼠循环血血小板和白细胞都有明显增高。 [结论] 1.CD34、CD133双抗体标记技术结合流式细胞仪检测可实现对大鼠循环血中EPCs的定量测定。 2.两种非创伤应激对大鼠EPCs的数量影响比较相似,EPCs均出现增高趋势。非创伤应激可以促进大鼠循环血EPCs的动员,为急性应激成为机体保护机制提供一种理论依据。 3.大鼠液压模型脑损伤后EPCs变化特征与TBI患者伤后循环血中EPCs的变化特征相似,TBI后大鼠循环血的EPCs水平同样存在先降低,后增高的变化特征。 4.各种应激后大鼠循环血中的EPCs的数量变化与血小板和白细胞数量均无显著相关。 5.TBI大鼠循环血EPCs一过性降低,可能并非由于机体应激不足或动员受抑制,而是损伤组织的消耗导致。这可能是补充或动员EPCs可在未来用于颅脑创伤治疗的理论依据之一。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R363

【共引文献】

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本文编号：2449488