结核分枝杆菌MPT64基因重组腺病毒疫苗的免疫原性及其保护效力研究

发布时间：2019-07-18 09:20

【摘要】： 目的：探讨结核分枝杆菌MPT64基因重组腺病毒疫苗的免疫原性及其对结核分支杆菌感染的免疫保护作用,为研究新的结核疫苗提供理论依据。 方法：将50只雌性C57BL/6小鼠随机分为5组(A为阴性对照组或正常组、B为阳性对照组或模型组、C为腺病毒载体组、D为实验疫苗组、E为卡介苗组),各组10只,每组再分为免疫原性组4只,保护效力组6只。分别将生理盐水(A、B组)、空腺病毒载体(C组)、结核分枝杆菌MPT64基因重组腺病毒疫苗(D组)、卡介苗(E组)免疫各组小鼠,4周后无菌取免疫原性组小鼠脾脏,研磨匀浆培养,取脾淋巴细胞培养上清液用ELISA法检测细胞因子(IFN-γ、IL-4)；用MTT法检测淋巴细胞增值活性。保护效力组小鼠除A组予生理盐水外均予5×106CFU结核分枝杆菌H37Rv标准毒力株经尾静脉攻毒,4周后,称取左肺及脾脏湿重计算脏器指数,并行组织病理检查及肺结核菌培养行菌落计数。 结果：①ELISA法检测脾淋巴细胞培养上清液中细胞因子,D组IFN-γ显著高于A、B、C组,比较差异有统计学意义,与E组比较差异无统计学意义；②IL-4水平5组均较低,各组间差异无统计学意义；③MTT法检测脾淋巴细胞增殖实验结果显示,D组的刺激指数最高,与A、B、C比较,差异有统计学意义,与E组差异无统计学意义；④大体病理结果显示D组和E组肺组织和脾组织病变明显较B、C组轻。⑤肺组织匀浆液结核菌菌落计数A组无菌生长,E组菌落数最少,其次是D组；D组与B、C组间差异有统计学意义,与E组间差异无统计学意义。 结论：初步实验表明：①结核分枝杆菌MPT64基因重组腺病毒疫苗具有较强的免疫原性,在小鼠体内能够诱导较强的细胞免疫应答,诱导的IFN-γ与BCG相比无明显差异,表明该疫苗免疫效果较好；②结核分枝杆菌MPT64基因重组腺病毒疫苗能增强小鼠对结核分枝杆菌感染的保护作用,其保护作用与卡介苗效果相当。
文内图片：
图片说明： 可见类上皮细胞和Langhan细胞;B组和C组肺结构有较多区域破坏，，肺组织可见多个散在结核病灶，其中干酪样坏死较多，液体渗出和淋巴细胞渗出较明显，大量结核结节形成，纤维化罕见，部分结果见图2。A为阴性对照组小鼠肺H五(xZoo)B为阳性对照组小鼠肺HE(x2oo)c为载体组小鼠肺HE(xZoo)D为实验疫苗组小鼠肺HE(xZoo)
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R392

【引证文献】

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1 蔺国珍;布鲁氏菌病LAMP检测方法的建立及双基因共表达分子疫苗研究[D];中国农业科学院;2012年

本文编号：2515787