肿瘤坏死因子-α诱导骨髓间充质干细胞凋亡作用的研究
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图片说明： s)进行单因素方差分析(one－wayANOVA)，两两比较用SNK检验;检验水准α=0．05。2结果2．1BMSCs细胞培养和鉴定倒置显微镜观察可见，原代培养的大鼠BM-SCs呈梭形或不规则的多边形，可贴壁生长，并有若干集落形成(生长形态类似于旋涡状)。第3代BMSCs经成骨诱导14、21d后，分别进行碱性磷酸酶染色及茜素红染色，其结果均为阳性(图1a、b);经成脂诱导14d后，可见脂滴形成(图1c)，油红O染色结果为阳性(图1d)。a．成骨诱导14d后ALP染色b．成骨诱导21d后茜素红染色c．成脂诱导14d脂滴形成情况d．成脂诱导14d油红O染色图1BMSCs成骨、成脂诱导分化鉴定结果(×100)2．2细胞活性检测结果台盼蓝可穿透变性的细胞膜，并通过与解体的DNA结合而使其着色(蓝染);而活细胞因能阻止台盼蓝进入细胞内，故不着色。本实验结果显示，20、40μg/L的TNF－α均能明显降低BMSCs的细胞活性，分别与0μg/L相比，差异均有统计学意义(P＜0．05);其中以40μg/L组的细胞活性降低最明显，与20μg/L组相比，差异亦有统计学意义(P＜0．05)(图2)。2．3Tunel染色观察结果荧光显微镜下可见，凋亡细胞呈红色荧光，并随着TNF－α浓度的升高，红色荧光率逐渐增加(图3)。各组细胞的凋亡率以40μg/L组最高，0μg/L组最低，各组间两两相比，差异均有统计学意义(P＜0．05)(图4)。*与0μg/L组相比P＜0．05;#与20μg/L组相比P＜0．05图2不同浓度TNF－α对BMSCs细胞活力影响的比较图3各组BMSCs经Tunel染色后荧光显微镜观察(箭头示凋亡细胞)(×200)牙体牙髓牙周病学杂志(ChinJConservDent)2015，25(7)·393·
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图片说明： 为阳性(图1d)。a．成骨诱导14d后ALP染色b．成骨诱导21d后茜素红染色c．成脂诱导14d脂滴形成情况d．成脂诱导14d油红O染色图1BMSCs成骨、成脂诱导分化鉴定结果(×100)2．2细胞活性检测结果台盼蓝可穿透变性的细胞膜，并通过与解体的DNA结合而使其着色(蓝染);而活细胞因能阻止台盼蓝进入细胞内，故不着色。本实验结果显示，20、40μg/L的TNF－α均能明显降低BMSCs的细胞活性，分别与0μg/L相比，差异均有统计学意义(P＜0．05);其中以40μg/L组的细胞活性降低最明显，与20μg/L组相比，差异亦有统计学意义(P＜0．05)(图2)。2．3Tunel染色观察结果荧光显微镜下可见，凋亡细胞呈红色荧光，并随着TNF－α浓度的升高，红色荧光率逐渐增加(图3)。各组细胞的凋亡率以40μg/L组最高，0μg/L组最低，各组间两两相比，差异均有统计学意义(P＜0．05)(图4)。*与0μg/L组相比P＜0．05;#与20μg/L组相比P＜0．05图2不同浓度TNF－α对BMSCs细胞活力影响的比较图3各组BMSCs经Tunel染色后荧光显微镜观察(箭头示凋亡细胞)(×200)牙体牙髓牙周病学杂志(ChinJConservDent)2015，25(7)·393·
【作者单位】： 北京武警总医院口腔医学中心;军事医学科学院基础医学研究所全军细胞与再生医学重点实验室;
【基金】：武警总医院二类课题基金项目(WZ20130209)
【分类号】：R329.2
【共引文献】
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本文编号：2516221
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