磁刺激对星形胶质细胞迁移的影响及机制研究

发布时间：2019-08-03 11:59

【摘要】： 第一部分不同强度磁刺激对星形胶质细胞迁移的影响及机制研究 实验一：不同强度磁刺激对星形胶质细胞迁移的影响 [摘要]目的研究不同强度磁刺激对星形胶质细胞迁移作用的量效关系。方法24只Sprague-Dawley大鼠按刺激强度被随机分为对照组(刺激强度：0Tesla)、0.76T组(刺激强度0.76Tesla)、1.52T组(刺激强度：1.52Tesla)、1.9T组(刺激强度：1.9Tesla),4组的刺激频率为1Hz,刺激量为30脉冲,均采用溴乙锭(EB)注射入脊髓左侧背索复制局灶性的脊髓损伤模型。刺激14天后,处死大鼠,Western-Blot检测GFAP、MAP-2,采用图像分析系统观察GFAP、Brdu和MAP-2的免疫组化表达及脊髓损伤空洞体积的变化。结果随着磁刺激强度的增加,在14天时空洞的体积逐渐缩小,组间差异具有显著性差异(P＜0.05)。在空洞缩小的区域中,可以观察到GFAP的阳性表达,而无Brdu、MAP-2的阳性表达。随着磁刺激强度的增加,GFAP的阳性表达显著增强(P0.05)。Western-Blot显示：随着磁刺激强度的增加,GFAP的光密度值相应增加,而MAP-2的光密度值没有明显变化,与组化的变化趋势一致。结论刺激频率为1Hz,刺激强度不大于1.9Tesla的条件下,磁刺激可促进星形胶质细胞的迁移,随着刺激强度的增强,星形胶质细胞迁移的能力亦增强。 实验二：不同强度磁刺激对星形胶质细胞迁移作用的机制研究 [摘要]目的研究不同剂量ERK抑制剂U0126对1Hz磁刺激促进星形胶质细胞迁移作用的影响,以探讨不同强度磁刺激促进星形胶质细胞迁移作用和ERK信号通路的关系,并选择U0126合适的阻滞剂量。方法24只Sprague-Dawley大鼠按U0126剂量被随机分为对照组(Omg/kg U0126, n=6)、低剂量组(0.1mg/kgU0126,n=6)、中剂量组(0.2mg/kg U0126, n= 6)、高剂量组(0.4mg/kg U0126,n=6),4组的刺激参数都为频率1Hz,强度1.52Tesla,刺激量为30脉冲；均采用溴乙锭(EB)注射入脊髓左侧背索复制局灶性的脊髓损伤模型。刺激14天后,处死大鼠,Western-Blot检测GFAP、ERK1/2和MAP-2,采用图像分析系统观察GFAP、ERK1/2和MAP-2的免疫组化表达及脊髓损伤空洞体积的变化。结果随着U0126剂量的增加,在14天时空洞的体积逐渐增大,GFAP和ERK1／2的阳性表达逐渐减弱,与对照组相比具有显著性差异(P0.05)；并且,GFAP和ERK1／2的阳性表达呈相同的趋势；U0126中剂量组和高剂量组作用则无明显差异(P0.05)；而病灶区域MAP-2呈阴性表达。Western-Blot显示：随着U0126剂量的增加,ERK1／2逐渐被抑制,0.2mg/kg和0.4mg/kgU0126都可完全抑制ERK1／2的表达,随着ERK逐渐被抑制,GFAP的表达亦逐渐减弱。结论不同剂量的U0126可抑制1Hz磁刺激引起的星形胶质细胞的迁移,0.2mg/kg是较合适的剂量；1.52Tesla,1Hz磁刺激引起的星形胶质细胞迁移与ERK信号通路有关。 第二部分不同频率磁刺激对星形胶质细胞迁移的影响及机制研究 实验一：不同频率磁刺激对星形胶质细胞迁移的影响 [摘要]目的研究不同频率磁刺激对星形胶质细胞迁移作用的量效关系。方法30只Sprague-Dawley大鼠按刺激频率被随机分为对照组(刺激频率：0Hz,强度：1.52Tesla)、1Hz组(刺激频率：1Hz,强度：1.52Tesla)、5Hz组(刺激频率：5Hz,强度：1.52Tesla)、10Hz组(刺激频率：10Hz,强度：1.52Tesla)和20Hz组(刺激频率：20Hz,强度：1.52Tesla),5组的刺激量均为30个脉冲,采用溴乙锭(EB)注射入脊髓左侧背索复制局灶性的脊髓损伤模型。刺激14天后,处死大鼠,Western-Blot检测GFAP、MAP-2,采用图像分析系统观察GFAP、Brdu和MAP-2的表达及脊髓损伤区空洞体积的变化。结果随着磁刺激频率的增加,在第14天时空洞的体积逐渐缩小,组间差异具有显著性差异(P0.05)。在空洞缩小的区域中,可以观察到GFAP的阳性表达,而无Brdu和MAP-2的阳性表达。随着磁刺激频率的增加,GFAP的阳性表达亦显著增强(P＜0.05)。Western-Blot显示：随着磁刺激频率的增加,GFAP的光密度值相应增加,而MAP-2的光密度值没有明显变化,与组化变化趋势一致。结论刺激强度为1.52 Tesla,刺激频率不大于20Hz的条件下,磁刺激可促进星形胶质细胞的迁移,并随着刺激频率的提高,星形胶质细胞迁移的能力亦增强。 实验二：不同频率磁刺激对星形胶质细胞迁移作用的机制研究 [摘要]目的研究不同频率磁刺激促进星形胶质细胞迁移过程中ERK1／2所起的作用,以探讨不同频率磁刺激促进星形胶质细胞迁移作用的机制,并选择U0126合适的阻滞剂量。方法24只Sprague-Dawley大鼠按U0126剂量被随机分为对照组(0mg/kg U0126, n= 6)、低剂量组(0.1mg/kg U0126, n=6)、中剂量组(0.2mg/kg U0126, n=6)、高剂量组(0.4mg/kg U0126, n=6)，4组的磁刺激参数均为频率10Hz、强度1.52 Tesla,刺激量30脉冲,均采用溴乙锭(EB)注射入脊髓左侧背索复制局灶性的脊髓损伤模型。刺激14天后,处死大鼠,Western-Blot检测3FAP、ERK1/2和MAP-2,采用图像分析系统观察GFAP、ERK1/2和MAP-2的表达及脊髓损伤空洞体积的变化。结果随着U0126剂量的增加,在第14天时空洞的体积逐渐增大,GFAP和ERK1／2的阳性表达逐渐减弱,与对照组相比具有显著性差异(P0.05),U0126中剂量组和高剂量组的作用相似无明显差异(P0.05)。而病灶区域MAP-2呈阴性表达。Western-Blot显示：随着U0126剂量的增加,ERK1／2逐渐被抑制,0.2mg/kg和0.4mg/kgU0126都可完全抑制ERK1／2的表达,随着ERK逐渐被抑制,GFAP的表达亦逐渐减弱。结论不同剂量的U0126可抑制10Hz磁刺激引起的星形胶质细胞的迁移,0.2mg/kg是较合适的剂量；1.52 Tesla,10Hz磁刺激引起的星形胶质细胞迁移与ERK信号通路有关；
【图文】：

立体定位仪下定位(左侧背索，脊膜下深0.7mm)

图3A:造模成功，形成局灶性病灶图3B:注药速度过快造成药物弥散二.治疗干预磁刺激器为武汉依瑞德医疗设备新技术有限公司生产CCY一I型(图4)，圆形刺激线圈直径为9cm，脉冲磁场峰值强度为3.5T。于脊髓损伤后24h开始给予磁刺激，将线圈水平置于大鼠脊柱上方，线圈边缘对准T10节段、距背部皮肤1cm的位置lv](图5)，刺激频率为1Hz，每天1次，每次30个脉冲，连续14d。对照组置相同环境下，未予磁刺激。
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R35

【引证文献】

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1 于洪丽;磁刺激穴位脑电特征信号提取及分析[D];河北工业大学;2011年

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本文编号：2522541