流感病毒全病毒灭活疫苗及疫苗佐剂在1型糖尿病小鼠中的效力研究

发布时间：2019-08-26 11:13

【摘要】：本论文由四部分组成：一)流感病毒、流感病毒疫苗、疫苗佐剂以及糖尿病简介；二)1型糖尿病小鼠对H5N1流感病毒易感性研究；三)1型糖尿病小鼠接种H5N1流感病毒全病毒灭活疫苗后的免疫应答及其保护效果研究；四)佐剂对H5N1全病毒灭活疫苗在1型糖尿病小鼠中的免疫应答及保护效果的增强作用研究。 (一)流感病毒、流感病毒疫苗、疫苗佐剂以及糖尿病简介。以、综述的形式描述了A型流感病毒的基本特征、H5N1流感流行情况及危害、H5N1流感病毒疫苗研究进展、疫苗佐剂研究进展、糖尿病流行情况及糖尿病实验动物模型等。 (二)1型糖尿病小鼠对H5N1流感病毒易感性研究。糖尿病小鼠对H5N1病毒易感是本研究的立论基础之一。我们利用STZ诱导雄性BALB／c小鼠建立1型糖尿病模型。取正常小鼠和1型糖尿病小鼠脾脏测定小鼠脾脏淋巴细胞中CD4+和CD8+细胞的比例并计算CD4+／CD8+比率。使用不同剂量的H5N1流感病毒感染正常小鼠和1型糖尿病小鼠,感染后取肺洗液测定肺部病毒滴度并统计小鼠存活率用于计算LD50。结果显示,1型糖尿病小鼠CD4+／CD8+比率比正常小鼠显著降低,H5N1流感病毒感染后,1型糖尿病小鼠的肺部病毒滴度比正常小鼠的肺部病毒滴度高,H5N1流感病毒在糖尿病小鼠肺部残存时间更长且1型糖尿病小鼠死亡率比正常小鼠高。 (三)H5N1流感病毒全病毒灭活疫苗在1型糖尿病小鼠中诱导的免疫应答及其保护效果研究。不同剂量的H5N1流感病毒全病毒灭活疫苗经腹腔注射途径一次免疫正常小鼠和糖尿病小鼠,用ELISA方法测定血清中特异性IgG抗体产生的动态过程以及抗体滴度,并使用HI方法检测中和抗体。用致死量H5N1流感病毒攻击小鼠后,取小鼠肺洗液测定小鼠肺部病毒滴度并观察剩余小鼠的体重变化和存活率。结果表明,一次免疫较低剂量的H5N1流感病毒全病毒灭活疫苗即可以诱导1型糖尿病小鼠和正常小鼠产生特异性抗体,但1型糖尿病小鼠体内抗体产生的时间被延迟且抗体滴度低于健康小鼠,一次接种H5N1流感病毒灭活疫苗,能完全保护正常小鼠和1型糖尿病小鼠抗致死量同型流感病毒的攻击,但与正常小鼠相比,1型糖尿病小鼠需免疫较高剂量的疫苗才能获得完全保护。 (四)疫苗接种是预防流感病毒感染的最佳方法,由于临床实验中H5N1流感病毒裂解疫苗和亚单位疫苗显示出较低的免疫原性,因此,研制高免疫原性、抗原节约的疫苗及安全、有效的H5N1疫苗佐剂对于糖尿病患者这类免疫受损伤者显得尤为重要。本研究使用一次免疫的方法将不同剂量的H5N1流感病毒全病毒灭活疫苗单独或与MF59或Al(OH)3混合后共同免疫健康小鼠和1型糖尿病小鼠,比较其在健康小鼠和糖尿病小鼠体内诱导抗体反应的能力；免疫4周后用致死量H5N1流感病毒攻击小鼠,评价疫苗的保护效果。结果显示,MF59和Al(OH)3,能增强H5N1全病毒灭活疫苗在1型糖尿病小鼠体内诱导的抗体反应,MF59和Al(OH)3诱导小鼠接种H5N1全病毒灭活疫苗后的免疫反应由Th1型向增强的Th1／Th2混合型转变。MF59的佐剂效果显著优于Al(OH)3。
【学位授予单位】：湖南师范大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R392

【参考文献】