慢性饮酒大鼠肺组织CTGF和TIMP-1的表达及意义

发布时间：2019-08-30 10:01

【摘要】： 目的：随着生活水平的提高、生活节奏的加快与工作压力的加大,酒精消费量与饮酒人数都在逐年上升,慢性饮酒已成为严重影响人类健康的重要因素之一。WHO2006年的一份报告显示过度饮酒与60多种疾病有关,饮酒可导致妊娠女性和新生儿疾病、癌症、神经精神疾病、心血管疾病、肝硬化、肺损伤、意外损伤等,酒精与人体健康的关系已成研究的热点。酒精对人类的几乎每个器官系统都有潜在的生物学效应,其中酒精对肺组织也有一定影响,其代谢特点及挥发性使得气道上皮处于高乙醇浓度下,长期处于这种环境下可以造成气道上皮损伤和肺组织重构,而导致酒精相关性肺病。目前对酒精能否引起肺纤维化的研究很少,本研究旨在通过建立慢性饮酒大鼠模型,观察肺组织中谷胱甘肽、羟脯氨酸含量及结缔组织生长因子(CTGF)、基质金属蛋白酶抑制剂.-1(TIMP-1)的表达,以探讨酒精与肺纤维化之间的关系及可能的机制,进一步寻找肺纤维化的可能致病因素,使人们对酒精的危害有进一步了解。 方法：根据Lieber-DeCarli酒精液体饲料配方配制含酒精和不含酒精而热卡相同的液体饲料。健康雄性SPF级Sprague-Dawley大鼠20只,体重160-200g,随机分成对照组(C组)10只,每日给定量无酒精液体饲料单笼喂养；酒精组(A组)10只,每日给定量酒精液体饲料单笼喂养,不再提供饮水。各组动物均于8周后麻醉处死,开胸分离完整气管和肺组织,右肺通过苏木素-伊红染色观察肺组织的形态变化,通过Masson染色观察肺间质中胶原沉积的情况,用比色法计算大鼠肺组织中的谷胱甘肽和羟脯氨酸的含量、通过Elisa检测肺组织中结缔组织生长因子、基质金属蛋白酶抑制剂-1的表达。应用SPSS15.0统计软件进行数据处理,计数资料以均数±标准差表示,组间比较采用t检验,选择P0.05(双侧)为差异有统计学意义。 结果： 1、一般状态：实验前大鼠一般状况良好,正常进食、排球状干爽便,皮毛顺滑有光泽。实验后各组大鼠摄食无显著差别,酒精组的大鼠体重增长缓慢,毛色枯黄,有脱毛、行动迟缓,排不成形稀便,易激惹。 2、HE染色结果显示：对照组肺泡结构清晰,肺泡壁及间质内无炎性细胞浸润。酒精组可见不同程度的肺泡及肺泡间隔炎性细胞浸润,部分肺泡壁破坏、塌陷,间隔增宽,胶原沉积。Masson染色结果示：酒精组较对照组在肺泡间隔中胶原纤维沉积增多。 3、比色法测定结果显示：与对照组比较,酒精组肺组织谷胱甘肽(GSH)含量减少；酒精组肺组织羟脯氨酸(HYP)含量增加,差异均有统计学意义(P0.05)。 4、Elisa实验结果显示：与对照组比较,酒精组肺组织结缔组织生长因子(CTGF)、基质金属蛋白酶抑制剂--1(TIMP-1)表达量升高,差异均有统计学意义(P0.05)。 结论：本实验证明用Lieber-DeCarli酒精液体饲料可以建立慢性饮酒大鼠动物模型,慢性饮酒可以引起大鼠肺组织谷胱甘肽减少,使肺组织的氧化抗氧化系统失衡,发生氧化应激反应；氧化应激产物一方面促进肺成纤维细胞释放大量促纤因子CTGF,另一方面氧化产物能诱导TIMP-1的表达而抑制基质金属蛋白酶的活性；从而促进细胞外基质的过渡沉积,促进肺组织中胶原含量增加与组织重塑；进一步说明酒精对肺间质纤维化的形成起重要作用,提示慢性饮酒可以造成大鼠肺损伤,导致肺间质纤维化,酒精可能是大鼠肺纤维化的原因之一。
【图文】：

刻度的自制负压饲养瓶(见附图一2)中，供大鼠自由饮用，酒精组给予A照组给予C饲料。整个造模过程中大鼠在造模的第1一2天饮用Lieber-D酒精液体饲料;第3一4天酒精液体饲料组大鼠饮用一半酒精液体饲料、精的液体饲料。无酒精液体饲料组继续饮用无酒精液体饲料至造模结天开始酒精液体饲料组饮用全量酒精饮料，所配饲料为全价饲料，不水，共喂养8周后处死。每日记录大鼠精神状态、毛色、排便情况及每周大鼠称重。

天数)差异均无统计学意义，见表4;整个实验过程中无酒精液体神状态好，食欲佳，鼻尖干燥，皮毛有光泽，，有塘便。而酒精液出现，精神萎靡，活动减少，反应迟钝，易激惹，鼻尖湿红，毛落，稀便等表现;酒精组有1只大鼠在第7周时，出现口腔、眼结食，症状持续加重3天后死亡。别照组表4各组大鼠总进食量和体重变化(牙士s)n造模前体重(g)造模结束时体重(g)10173.9士11.7278.6土18.3平296精组9177.1士8.2185.4士27.42880.7078.80850.4880.0000.12000806040200060408009

本文编号：2530673