ACE2基因转染对VSMC血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA表达的影响

发布时间：2019-09-27 06:35

【摘要】： 目的:研究ACE2基因转染SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞后对血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA表达的影响。 方法:使用SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC),用脂质体法将ACE2转染SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,设正常细胞组、空载体组、ACE2组、AngⅡ组、ACE2 +AngⅡ组,通过RT-PCR检测AT1受体mRNA的表达。 结果: ACE2转染组AT1受体mRNA表达的OD值较正常细胞组和空载体组的OD值有明显降低,且呈现时间(8h—72h)和浓度(6ug—8ug)依赖性(P0.05)。AngⅡ对AT1受体mRNA表达的影响与AngⅡ浓度有关,当AngⅡ浓度≤10-8mol/L时,AT1受体mRNA的表达较正常细胞组明显增加(P0.05),以浓度为10-9mol/L时最明显。对同时转染pm-ACE2和用AngⅡ孵育细胞,与正常细胞组和空载体组相比,能明显降低AT1受体mRNA的OD值(P0.05),但作用强度不如单用pm-ACE2转染强(P0.05)。 结论:ACE2基因转染SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞后能降低血管紧张素Ⅱ受体1 mRNA的表达,且呈现时间(8h—72h)和浓度(6ug—8ug)依赖性,ACE2转染后能够逆转AngⅡ对血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA表达的影响。
【图文】：

结 果1、大鼠 VSMC 的鉴定结果细胞形态学鉴定：采用组织贴块法在体外成功培养出 SD 大鼠胸主动肌细胞。倒置相差显微镜下观察细胞形态及生长状况。从第 4-5 天起，组围可见有细胞生长，，此时细胞形态多样（梭形、纺锤形、不规则形），以为中心向外呈放射性生长，形成细胞晕。一般 7-10 天时，相邻组织块的相互融合，且铺满培养瓶底的 2/3 以上，出现“峰和谷”样的生长模式：胞交叉重叠生长而形成“峰”，“峰”与“峰”之间细胞呈单层或层数少，少散在，而称为“谷”。“峰和谷”样的生长模式，为血管平滑肌细胞特异特征。（图 1A）

图 1B 物镜×102、提取的质粒 pm—ACE2 及 pcDNA3.1/Hygro（+）与电泳比较1 2 M 3 4M：Maker DL：10000,1：扩增后提取的 pm-ACE2，2：扩增后提取的 pcDNA3.1/H3：原质粒 pm-ACE2，4：原质粒 pcDNA3.1/Hygro（+）图 2 扩增的质粒 pm—ACE2 及 pcDNA3.1/Hygro（+）与原泳结果
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R346

【参考文献】

相关期刊论文 前3条

1 张红,张梅,赵荣瑞;血管紧张素Ⅱ对主动脉平滑肌中血管紧张素AT_1受体的影响[J];山西医科大学学报;1998年03期

2 戚文航;;高血压领域研究进展[J];心血管病学进展;2006年05期

3 ;慢性收缩性心力衰竭治疗建议[J];中华心血管病杂志;2002年01期

本文编号：2542563