重组hIL-10抗家兔皮肤移植反应及其对Treg细胞、IL-10、TGF-β的影响

发布时间：2019-10-01 15:55

【摘要】： 目的：经rhIL-10或CsA作用,观察家兔皮肤移植后移植皮片出现排斥的时间、移植皮片存活时间及外周血液中Treg细胞、IL-10.TGF-β的变化,研究IL-10在抗移植排斥反应治疗中Treg细胞、调节因子IL-10.TGF.β的变化,探讨IL-10抗免疫排斥作用的机制。观察IL-10单独或与CsA协同应用的抗免疫排斥效果,为减少CsA药品副作用寻找新型抗移植免疫的药物,为IL-10的临床应用提供实验依据。方法：(1)家兔36只,分受体和供体各18只,每只供体兔为1只受体兔供皮,于背部行皮肤移植手术。受体随机分成6组分别为①rhIL-10小剂量组：rhIL-105μg/kg/d；②rhIL-10大剂量组：rhIL-10 10μg/kg/d；③CsA小剂量组：CsA 5mg/kg/d；④CsA大剂量组：CsA 10mg/kg/d；⑤联合组：rhIL-10 5μg/kg/d+CsA 5mg/kg/d；⑥阴性对照组：NS 1ml/d.各组均于术前1天开始肌注给药,连续用药10天。(2)术后每天观察移植皮片情况,以移植皮片色泽变暗、发黑变硬、红肿水疱及皮片翘起等现象来判定移植排斥,以移植皮片面积80%出现以上现象视为皮片坏死,记录排斥反应时间及皮片存活时间。(3)各组分别于术前1天、术后1、4、7、14、21、28天采集外周血,流式细胞术检测外周血CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞比值,酶联免疫吸附试验检测外周血细胞因子IL-10、TGF-β水平。比较各组方案对皮片存活时间及各项指标的影响。(4)术后30天采集外周血,检测血清IL-10抗体。结果：(1)实验组家兔移植皮片出现排斥的时间与⑥对照组相比均有一定程度延缓,除①组外其他实验组与⑥组相比差异均有显著性(P0.05)。(2)家兔移植皮片存活时间较⑥组明显延长,且差异显著(P0.05)。实验组之间比较,⑤组较①组皮片存活时间长,且差异显著(P0.05)。⑤组较③组皮片存活时间长,差异无显著性(P0.05)。(3)皮肤移植术后各组家兔外周血CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞比值较术前明显升高(P0.05)。术后4天、术后7天①组与②组均高于⑥组、③组、④组且差异有统计学意义(P0.05)。术后7天④组比⑥组低,差异有统计学意义(P0.05)。⑤组与①组及③组比较,差异有统计学意义(P0.05)。(4)皮肤移植术后各组家兔外周血IL-10水平较术前明显升高(P0.05)。①组、②组在术后1、4、7天均较③组、④组、⑤组高(P0.05)。(5)皮肤移植术后各组家兔外周血TGF-β水平较术前明显升高(P0.05)。①组、②组、③组、④组、⑤组在术后各采样点TGF-β水平差异均无统计学意义(P0.05)。(6)家兔术后外周血IL-10水平与CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞水平呈正相关。(7)各组家兔用药血清IL-10抗体与抗体阳性对照组有显著性差异(P0.05)。结论：(1)IL-10可推迟家兔移植皮片出现排斥的时间,可以延长移植皮片的存活时间。(2)IL-10抗皮肤移植反应与CsA有一定的协同作用。(3)IL-10抑制移植排斥反应的作用,有可能与CD4+CD25+T细胞及IL-10升高有关,IL-10在体内起作用的机制可能与TGF-β无关。(4)外源性rhIL-10注射家兔未产生IL-10抗体。
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R392

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本文编号：2544506