锌指蛋白zbtb20对巨噬细胞TLR4信号转导的调控作用

发布时间：2019-11-09 18:57

【摘要】： 本课题研究了锌指蛋白zbtb20对巨噬细胞TLR4信号转导的调控作用。主要构建了zbtb20真核表达载体并建立了小鼠腹腔巨噬细胞的zbtb20干扰模型和小鼠巨噬细胞系RAW264.7的zbtb20稳定表达模型,发现干扰zbtb20的表达可以抑制LPS诱导的巨噬细胞分泌炎症细胞因子和Ⅰ型干扰素,并抑制ERK,JNK,P38的活化；以zbtb20基因缺陷小鼠的巨噬细胞为模型进一步验证了该结果。相反,过表达zbtb20具有促进效应。因此,zbtb20是TLR4信号通路的正向调控分子。
【图文】：

展锌指蛋白zbtbZo的研究，我们首先对其进行了克隆，以小鼠巨克隆了zbtb20的全长序列，并将其连入PcDNA3.1载体，构建了表达载体，为下面的研究奠定了基础。同时我们观察了LPS刺激的表达情况，，结果发现随着LPS的刺激zbtb20表达量下降。与方法要材料载体和分子克隆试剂:菌菌株nH5a为本室常规保存。penNA3.1载体(见图l一l)购自INA聚合酶来自Promega。琼脂糖DNA回收试剂盒、质粒提取和纯化试剂盒均来自QIAGEN。T4DNA连接酶和各种限制性内切Biolab.琼脂糖和总RNA抽提试剂盒来自华舜生物工程公司。引工程有限公司合成。

NewEnglandBiolab.琼脂糖和总RNA抽提试剂盒来自华舜生物工程公司。引物由上海生工生物工程有限公司合成。图1一1真核表达载体 PcDNA3.1质粒图谱Figurel一 1PhysicalmaPofttlePeDNA3.1exPressionveetor2.细胞株及其相关试剂
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R329

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