三种致病菌“活的非可培养状态”的诱导与研究

发布时间：2020-01-27 23:03

【摘要】： 细菌“活的非可培养”状态是细菌在不良环境下的一种特殊存在形式,当细菌处于不良环境条件下,细胞缩成球形,用常规方法培养不能生长繁殖,在适当的条件下仍然能复苏的一种特殊生存方式。进入非可状态的病原菌在不良环境中,丧失了在培养基上生长繁殖的能力,但仍具有与原菌相似的致病性。这可能成为逃避检测的“隐性”传染源,对周围的环境及人类安全构成潜在威胁。 实验中选取三种典型致病微生物,大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌作为对象。在食品和饮用水的微生物指标检测中,革兰氏阴性的大肠菌群通常作为微生物污染的主要指标菌,大肠菌群的指标直接影响着水微生物指标是否过关。而沙门氏菌通常为食品和饮用水中常见的致病菌,是引起通常腹泻主要微生物。金黄色葡萄球菌更是常见的革兰氏阳性食品性致病微生物,同时国内外相关报道对于活的非可培养状态多集中在革兰氏阴性菌细菌上,而对于革兰氏阳性菌的活的非可培养状态研究却研究的很少。 本实验研究了低温和重金属Cu~(2+)等诱导条件对大肠杆菌和沙门氏菌,金黄色葡萄球菌进入“活的非可培养”状态的影响,并对非可状态下菌体生物学特性、检测方法、致病性及条件进行深入地研究。并尝试利用过氧化氧酶,吐温20进行了复苏实验。 细菌的“活的非可培养”状态现象广泛存在于自然环境中和人类的生活领域,对人类健康造成潜在的威胁。现阶段我国常规的水和食品卫生检验及进出口商品检疫等中,细菌检测仍多用常规的培养方法,这样的结果显然不可靠。基于对公众健康和安全的考虑,加强对细菌VBNC状态的研究尤为迫切,实际意义重大。
【图文】：

3Ti订〔(days)图3一12c了‘诱导条件下金黄色葡萄球菌可培养菌数变化 F193一 ZN::mberoft一 leeulturab一es‘，，z一 rezlsinducedbyct一2‘ 3.1.5正常状态菌体菌落与诱导菌体在常规培养基生长对比:种汁常状态的菌甘液(约105一IO6CFU/mL)和三种诱导后的l商体菌甘液(约1护一1护CFU/mL)分别取In:L加入平板，肉汤琼脂培养基倾注摇匀，J乙37℃下培养24h/L’.右。观察到正常状态下的环中致病菌在培养基平板t:均有大狱菌落出现，而经诱学的二种菌在培养从‘{吮板1几末出现菌落。取同样的菌甘液加入液体肉汤培养基培养37’C卜摇床培养241:。发现含有正常状态致病菌液体培养基均出现混浊，颜色变浅等现象，吸光度值增大。而诱导后的菌体培养基仍然澄清，透明，吸光度值保持不变。正常状态菌体菌落与诱导菌体在常规固体和液体培养基生长对比结果可以得出:诱导后的三种菌体已经失去了可培养性，至于它们是己经死亡还是处于活着的特殊状态，还需要通过营养物质的吸收和进一步的原子力显微镜管观察得出结论。图3一13正常状态大肠杆菌菌落照片 F193一 13PhotoofE

天津科技大学硕卜学位论文图3一15正常状态下的沙门氏菌菌落照片 F193一 15PhotoofSalmonellainthenormalstate图3一 16vBNC状态的沙门氏菌菌落照片 F193一 16Photoofsalmonellahadbeenindueed图3一17正常状态金黄色葡萄球菌照片 F193一 17Photoofs.aureusinthenormalstate图3一 18VBNC状态金黄色葡萄球菌照片 F193一 18Photoofs.aureushadbeeninduced
【学位授予单位】：天津科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R378

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本文编号：2573794